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文献和实验
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库存 :大量
供应商 :深圳市科润达生物工程有限公司
检测限 :科研
检测方法 :酶联免疫法
应用 :用于人血清、血浆中抗普氏立克次体IgG的体外半定量检测。
适应物种 :人
标记物 :普氏立克次体IgG
样本 :血清/血浆
规格 :96T
普氏立克次体IgG检测试剂盒
(酶联免疫法)
(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名称:普氏立克次体IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Rickettsia prowazekii EIA IgG Antibody Kit
【产品规格】
96T
【预期用途】
该试剂盒用于人血清、血浆中抗普氏立克次体IgG的体外半定量检测。
【前言简介】
普氏立克次体出现在全球范围内,并且通过受到感染的虱子(最初宿主为啮齿动物或者鼯鼠)进行传播。人体受感染后会诱导产生出特异性的抗体回应,产生的特异性抗体是可以被检测到的,因此可以被当做一种间接的检测手法来诊断受感染的人群。
【检测原理】
试剂盒微孔板中包被有从普氏立克次体中纯化出的外膜蛋白(rOmp B)。病人血清用样品稀释液稀释,之后样品被加入到微孔中孵育。孵育过程中,血清抗体与微孔板抗原发生特异性结合。洗板洗去未结合的部分,之后加入酶标的抗人IgG。孵育过后洗板,洗去未结合上的酶联物。之后加入酶底物液反应。形成蓝色,颜色的深度与样品中特异性IgG的浓度成正比。定时反应后,加入终止液,颜色变黄,微孔板使用酶标仪在450nm下读取吸光值。
【试剂盒成分】
微孔板 12×8
包被有纯化的普氏立克次体外膜蛋白(rOmp B)
样品稀释液 2×50ml
含牛血清蛋白及吐温20的PBS缓冲液 即用型
酶联物 1×12ml
辣根过氧化物酶标记的抗人IgG 即用型 避光保存
阳性质控 1×120ul 蓝色 1:10预稀释
临界质控 1×200ul 绿色 1:10预稀释
阴性质控 1×120ul 红色 1:10预稀释
底物液 1×12ml
琥珀色瓶,含TMB底物液以及双氧水 即用型 避光保存
终止液 1×12ml
含稀释好的硫酸 即用型 避免接触皮肤
PBS缓冲液
将试剂盒提供的小包加入到1L蒸馏水中 以配置PBS缓冲液
吐温20 1×2ml
含25%吐温以及75%PBS 加入到1L的PBS缓冲液中 配制成洗液。
所需材料(未提供)
- 蒸馏水
- 洗瓶
- 试管
- 移液器
- 粘性盖板
- 450nm读数酶标仪
【储存及稳定】
试剂盒应2-8℃保存,在实验前应先平衡至室温(20-25℃)
已打开的微孔板需密封保存在包装袋中,温度2-8℃下,3月内有效。
【样品采集及处理】
允许全血样品凝集,通过离心分离血清样品。2-8℃下保存。
要保存5天以上,请于-20℃环境下保存。
【检测方法】
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检测过程
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【结果计算】
临界质控是用来划分阴阳性。临界质控吸光值±20%范围内可被认为是可疑区。大于20%被认为是阳性;低于20%则被认为是阴性。
【期望值】
由于地域及检测人口的不同,检测值也会存在差异。
在病区中,症状不明显或者只出现轻微症状的病人的检测,血清阳性率约为7%~26%。
【局限性】
与伤寒斑疹组的立克次体存在交叉反应。与斑疹热组立克次体的交叉反应比较少,一般不会检测到。
【注意事项】
- 不要使用过期的试剂
- TMB底物液与酶联物都是光敏的,注意避光保存
- 液体试剂含0.01%的汞作为防腐剂,摄入可能会引起中毒。
- 终止液中含0.2N硫酸,如果与皮肤发生接触,请使用大量清水冲洗。
【参考文献】
1. La Scola, Bernard and Didier Raoult. J. Clin. Microbiol. 1997; 35: 2715 – 2727
2. Raoult, Didier and Gregory A. Dasch. J. Clin. Microbiol. 1989; 27: 2073 – 2079.
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