细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货

细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货

价格: ¥110 - 3320

品牌:百奥莱博

货号:KFS285

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产品详情

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保存条件 :RT,避光

保质期 :12个月

英文名 :Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit

库存 :686

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

规格 :100T

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


名称:细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货
规格:100T
产地:国产|进口
编号:KFS285
英文名:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
形态学检测是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体:最后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化,可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。

试剂盒组分:
Dye Reagent 1×10mL
Dye Reagent 2×1mL
Buffer A×10mL

注意事项:利用血球计数板进行该项操作时,不要用血计板配套的质地较硬的盖玻片,而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。

操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡,消化收集细胞;
2. 用PBS 洗涤细胞二次,并调成浓度为1×106cells/ml 细胞悬液;
3. 吸取50~100μL 的细胞悬液均匀涂布于载玻片(A 片)上或用离心涂片机制片,室温晾干,甲醇固定5min;
4. 在A 片上滴加数滴100μL 的Dyes Reagent 1 室温染色1 min,用水轻轻洗去染液;
5. 在含体积分数为1%盐酸的80%乙醇中分化10 s,流水冲洗1 min,晾干,显微镜下观察细胞的形态。
6. 在另一张涂有细胞并已于无水乙醇固定2min 的载玻片(B 片)上滴加100μL 染色液2(Dyes Reagent2 :Buffer A=1:9 的混合液),室温染色5~20min,用水轻轻洗去染液,室温晾干;
7. 二甲苯浸泡3 min,以去除杂质,使载玻片透明,最后树脂封片,显微镜下观察细胞形态;
8. 观察200-500 个细胞,计数凋亡细胞所占的比例。

结果分析A 片:凋亡细胞皱缩,胞膜完整。染色质凝聚,嗜碱性增强,染成深蓝色,呈环状或新月状附在核膜周围,或细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒,核膜消失。而坏死细胞体积增大,染色质变稀疏成网状,嗜碱性减低,染成淡蓝色,胞核破碎,细胞膜不完整。

B 片:凋亡细胞皱缩,胞膜完整。胞浆稀少或缺乏,染成淡红色,染色质凝聚,染成深紫色,细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒。

计算细胞凋亡率和死亡率:
细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%
细胞死亡率=坏死细胞/细胞总数×100%

储存:RT,避光,有效期12个月。
细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货
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·kFluor594标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:KFS410
英文名称:keyFluor594 Goat anti-Rabbit IgG(H+L)
规格:100μL

浓度:2.0mg/ml
储存:4℃避光,有效期6个月(或-20℃避光,有效期一年)

荧光标记的山羊抗兔免疫球蛋白抗体能被荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,流式细胞术,荧光吸光检测器检测出。我们所给出的荧光标记宽度使我们的试剂几乎能适用于任何荧光检测机器。

山羊抗兔免疫球蛋白抗体是为了能和所有类型的兔免疫球蛋白重链和轻链起反应的同类纯化抗体准备的。为了把交叉反应的影响降到最低,相比于其他抗体,山羊抗兔免疫球蛋白抗体应优先选择从兔免疫球蛋白和血清中提取。标记每个聚合物的标准是每一个免疫球蛋白分子用2-8个荧光团或生物素分子标记。在准备阶段,必须检测样品中有没有非结合的染料,并且把样品在无荧光实验中做检测以确保较低的非特异性染色的可能。

使用说明
1. 在使用前,用微型离心机短暂地分离蛋白质溶液,留取上清液进行实验。这一步除除去了储存中可能形成的蛋白质聚合物,因此减少了非特异性背景染色的可能。
2. 因为在不同的应用条件,染色方法是不同的,所以应该根据经验需要稀释适量的抗体。
3. 对于荧光团和生物素标记抗体, 1-10μg/mL 的终浓度应该适用于大部分的免疫组织化学应用。
4. 对于流式细胞术,1×106个细胞才能等到令人满意的结果。

·细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)
编号:KFS154
英文名称:Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester
规格:5mg
CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。

CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。

储存:-20℃,避光,有效期6个月。


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·WB抗体清除液(酸性)
编号:KFS062
规格:500ml
Western Blot 抗体清除缓冲液(Stripping buffer),用于Western Blot 中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测其它蛋白,通过使用抗体清除液,充分去除结合的一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。

Western Blot 抗体清除缓冲液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5 次。酸性抗体清除液适用于NC 膜和PVDF 膜上的抗体清除。

使用说明:
1. 在完成Western 化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5 分钟。
2. 弃蒸馏水,加入适量的Western 一抗二抗去除液(酸性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗30-60 分钟。
3. 弃Western 抗体清除液,并吸尽残余液体。加入TBS、TBST 或PBS 漂洗3-4 次,每次在摇床上漂洗3-5 分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western 的后续操作。

注意事项:
1. 如多次重复使用同一张膜5 次以上,有可能会导致蛋白信号的减弱,建议膜重复使用不超过5 次。
2. 使用ECL 等类似的化学发光试剂进行的Western Blot 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测,例如DAB,NBT/BCIP 等,不适用于本试剂。
3. Western Blot 抗体清除缓冲液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。

·细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM,PI法,适用于FACS、FM)
编号:KFS337
英文名称:Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells 说
规格:1000T
本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针,通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞,包括贴壁细胞核某些组织,但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。

原理:在钙黄素AM 存在活细胞内时,其特点就是由于胞内无所不在的酯酶活性作用,由几乎无荧光、具有细胞膜透性的钙黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质(Ex/Em:495nm/520nm)。而对于受损的细胞膜来说,碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞,与核酸结合,荧光信号从而放大40 倍,产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞(Ex/Em:530nm/620nm)。


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细胞凋亡形态学检测试剂盒厂家现货
赤霉素GA4+7 Zincon
CYB161060 狗IgG(冻干粉)
酵母聚糖A L-Alanine methyl ester hydrochloride 58856-93-2
ARB12808 小鼠一氧化氮(NO)elisa测定使用说明书 Mouse nitric oxide,no ELISA KIT
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