北京现货柱式质粒大量提取试剂盒促销

保存条件 ：室温

保质期 ：12个月

英文名 ：A large number of Plasmid Extraction Kit (centrifugal column type)

库存 ：250

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

规格 ：10次

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货柱式质粒大量提取试剂盒促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货柱式质粒大量提取试剂盒促销
品牌：百奥莱博
编号：ALH088
产地：国产|进口
规格：10次
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
漂洗液WB————————————50ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、方便，从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达12000g，带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间，提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，质粒应该保存－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：柱式质粒大量提取试剂盒|质粒大量制备试剂盒|大量质粒提取试剂盒|大量质粒制备试剂盒

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·大量细菌基因组DNA提取试剂盒
编号：ALH139
英文名称：Bacterial massive genomic DNA Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒用于快速的从各种细菌中大量提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
细胞核裂解液———————90ml×2
蛋白沉淀液————————60ml
DNA溶解液————————10ml
RNaseA(10mg/ml)—————500μl

产品特点：
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·血浆miRNA提取试剂盒
编号：ALH067
英文名称：Plasma microRNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解血清血浆RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA在高浓度乙醇下吸附于离心柱内特殊硅基质膜， 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除， 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15～30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和异丙醇或者乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血清、血浆样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题

产品组分：
Lysis buffer————避光50 ml
Wash Solution 1————12 ml（第一次使用前加入28ml 无水乙醇）
Wash Solution 2/3————10 ml（第一次使用前加入42ml 无水乙醇）
RNase-free H2O————10 ml
吸附柱和收集管————50 套

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.特殊的裂解液配方，可以处理更多的血清/血浆样品。
4.多次柱漂洗确保高纯度，可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项
1. 第一次使用前请先在Wash Solution 1 瓶和Wash Solution 2/3 瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 除说明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇，氯*(代"仿")。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. RNA 纯度及浓度检测：
一般情况下通过测量OD260 值可以知道RNA 产量，测量OD260/OD280 比值可以是衡量蛋白质污染程度的指标之一，但是由于血清/血浆的RNA 含量特别低，已经低于分光光度计测量的下限，无法测量准确，因此一般无法通过测量OD 值或者比值的方法来判断纯度或者浓度，只能通过下游做荧光定量RT-PCR 来判断产量。同时无细胞的血清/血浆中的RNA 主要是小于100 nt 的小RNA，因此传统的电泳检测RNA 完整性并不适用于血清/血浆RNA。

储存条件：室温，有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)


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·10mM dNTP混合溶液
编号：ALH286
英文名称：10mM dNTPs Solution
规格：1ml|5ml
本品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔混合液，浓度均为10mM，PCR反应时,不用稀释可直接使用，PCR反应时的标准使用量为每50μl反应液使用1μl（终浓度200μM）

储存条件：-20℃。

·Pfu DNA聚合酶
编号：ALH223
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：500U|3000U
本酶用于DNA的高保真扩增，，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析（SNP）和平末端补平等。是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中分离纯化的， Pfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。Pfu酶是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的。其PCR产物为平端，可直接用平端载体克隆。 高保真PFU对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。本酶浓度为5U/μl。

本品组份(500U)：
Pfu DNA Polymerase———————————————500U
10×Pfu Buffer+(with MgSO4)-——————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)—————————0.2ml

单位定义：一个单位Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

酶贮存缓冲液：50mM Tris-HCl(pH 8.2)，0.1mM EDTA，1mM DTT，Stabilizers，50% glycerol。

10×Pfu Buffer (含Mg2+)：200 mM Tris-HCl (pH8.8)，100 mM KCl，100 mM(NH4)2 SO4，20 mM MgSO4，其他成分。

注意事项：
(1) Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度比Taq酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，建议Pfu酶的延伸速度为每分钟1kb 如扩增片段小于4kb；延伸速度为每分钟0.5kb 如扩增片段大于4kb。同时Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物， 所以应先加dNTP 后，再加Pfu酶到反应体系中，并立即进行PCR 反应。
(2) 用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，Tm在55～80℃ 之间，引物浓度在0.1～0.5μM之间，比Taq酶略高。
(3) Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
(4) 高保真PFU 对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。

储存条件：-20℃。

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