大鼠瘦素检测试剂盒

大鼠瘦素检测试剂盒

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品牌:日本IBL

货号:27295

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库存 :大量

供应商 :深圳市科润达生物工程有限公司

检测限 :科研

检测方法 :酶免法

应用 :用于大鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清中瘦素的定量检测

适应物种 :大鼠

标记物 :瘦素

样本 :血清/血浆/细胞上清液

规格 :96T

大鼠瘦素酶免试验试剂盒
(日本IBL 27295)
简介
1950年发现隐性肥胖基因突变导致肥胖,且与二型糖尿病综合征的病态肥胖类似。1994年在洛克菲勒大学Freidman团队发现肥胖基因编码形成瘦素。瘦素是由肥胖基因产生的16KDa的分泌型蛋白。脂肪组织产生瘦素并释放至血液中,随着脂肪的累积,血液中瘦素的水平含量也呈增长趋势。瘦素作为lipostat,随着脂肪组织内脂肪的沉积而增加;它还可作为一激素,指令大脑终止食物的消化和增加活动;还证明了可用于标记和控制青春期的开始;另外,近期研究表明,瘦素可通过中枢神经系统抑制骨形成。
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中瘦素的量成正比
检测范围
56.25~3600pg/mL
预期用途
此试剂盒用于大鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清中瘦素的定量检测
试剂盒组成
  • 微孔板,96T,包被有抗大鼠瘦素兔子IgG抗体,亲和纯化
  • 标记抗体浓缩,30X,0.4ml,HRP标记的抗大鼠瘦素兔IgG Fab片段
  • 标准品,0.5ml,2支,大鼠瘦素
  • EIA缓冲液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
  • 标记抗体稀释液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
  • 着色剂,TMB,15ml
  • 终止液,1N硫酸,12ml
  • 洗涤缓冲浓缩液,40X,50ml,0.005%吐温20的磷酸缓冲液
准备步骤
试验所需材料但试剂盒未提供
  • 酶标仪(450nm)
  • 带刻度的量筒与烧杯
  • 孵箱(37℃±1℃)
  • 吸水纸
  • 稀释试管
  • 微量移液器和取样吸头
  • 去离子水
  • 坐标纸(log/log)
  • 用于稀释标准品的试管
  • 洗涤瓶

试剂准备
  • 洗涤缓冲液制备:先将洗涤浓缩液平衡至室温,充分混匀,然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀,即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内,并于2周内用完
  • 标记抗体的制备:用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍,即得。
例:如果只测一条板,8孔,则需要标记抗体800ul(30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液,混匀,使用时每孔加100ul)
此步骤在实验开始前完成
剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内,保存在4℃
  • 标准品的制备:吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内,充分混匀,得到7200pg/ml的大鼠瘦素标准品
  • 标准品的稀释:准备8个试管用于标准品的稀释,每管加入230ul的EIA缓冲液

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