尼氏染色

服务名称 ：神经元尼氏染色实验服务

提供商 ：晶莱生物

规格 ：样本

实验技术简介：
Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法，以发现Nissl小体和Nissl变性而闻名。常用的碱性染料有Cresyl violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫）；thionine (硫荲)；tolridine blue (甲苯.胺蓝)等。
尼氏体为嗜碱性物质，又称嗜染质，光镜 下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。在一些大型的运动神经元，尼氏体大而多，宛如虎皮花纹，又称“虎斑”。电镜下，尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间 的游离核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一，神经元胞质另外一特征性结构为神经原纤维。

实验技术原理：
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体，它们主要分布于神经细胞 的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫（Cresyl fast violet）亚 甲蓝（m*th*lene blue）甲苯.胺蓝（toluidine blue）硫董（thionin）等钭其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内 的尼氏体更可发生变化，严重的可消失。

实验操作流程：
1、切片脱蜡至水
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、无.水.酒.精脱水，二甲苯透明，中性树胶

实验结果：
神经细胞单位：紫-蓝色 细胞核：紫-蓝色 尼氏体：紫-深蓝色

结果展示：

神经元尼氏(nissl)染色

客户提供：
1、组织样品：新鲜组织放入液氮或-80度保存，组织不少于100mg；
2、培养细胞：通过细胞计数取不少于2×10⁶个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-80℃，避免反复冻融）；
3、血液细胞标本：以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
4、血清或细胞培养液标本：离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
5、石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片等。
6、样本运输：可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后，加冰袋寄送；
细胞样本也可直接寄送培养瓶（密封保证不污染、培养液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（送视路程远近2-3天可到达）。

交付标准：
1、图片；
2、完整项目报告（材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果）。

其他：
1、应用酒精分化切片，要迅速，防止过度分化，将切片上的颜色全部脱掉。

晶莱生物病理类实验服务总览表

类别	服务项目	备注	说明
制 片 前 处 理	石蜡包埋	包埋1块	固定后组织按客户要求取材，脱水，包埋成蜡块（进口石蜡）
	特殊包埋（细胞、材料、眼球等）	包埋1块	包埋要求难度较高(含特殊位置取材)
	石蜡组织芯片	阵列点位包埋	客户提供供体蜡块及标本信息
	软化（肝硬化、皮肤结痂、植物等）	1块标本软化	较为坚硬组织软化处理
	骨组织脱钙（小）	1块标本脱钙	最大面≤2cm²骨组织脱钙
	骨组织脱钙（大）	1块标本脱钙	最大面＞2cm²骨组织脱钙
	骨组织EDTA脱钙（小）	1块标本脱钙	最大面≤2cm²骨组织EDTA脱钙
	骨组织EDTA脱钙（大）	1块标本脱钙	最大面＞2cm²骨组织EDTA脱钙
	石蜡白片	石蜡白片1片	组织防脱载玻片石蜡白片
	冰冻组织制备	冰冻包埋及前处理	4%多.聚.甲.醛固定的组织或OCT包裹的新鲜组织（-80℃或液氮内保存，干冰运输）
	冰冻切片	冰冻组织切片1片	同一组织连续切片3张以上免制备费
染 色	HE染色	染色含切片	苏木.精-伊红染色法，观察组织形态
	油红O染色	染色含冰冻切片	4%多.聚.甲.醛固定，冰冻切片。对组织内脂质（如脂滴）染色
	番红O固绿染色	染色含切片	常用于植物、软骨组织形态染色
	Masson染色	染色含切片	观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度
	天狼猩红染色	染色含切片	观察组织纤维化程度，及偏振光进行胶原亚型的分区
	PAS糖原染色	染色含切片	观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化；肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化
	阿利新蓝染色	染色含切片	常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色
	甲苯.胺蓝染色	染色含切片	观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布
	尼氏染色	染色含切片	观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化
	LFB髓鞘染色	染色含切片	观察神经髓鞘的形态及变化
	普鲁士蓝染色	染色含切片	常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位
	VG染色	染色含切片	显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化
	EVG染色	染色含切片	观察血管弹性纤维的形态及变化
	VonKossa染色	染色含切片	观察组织内病理性钙沉积情况
	刚果红染色	染色含切片	一般用于组织淀粉样变染色
	维多利亚蓝染色	染色含切片	用于弹力纤维染色
免疫 组化	免疫组化预式	染色含切片	试两个一抗浓度后拍照
	免疫组化正式	染色含切片	客户提供一抗，常用二抗公司提供
	免疫组化芯片	染色含切片	免疫组化组织芯片染色
	免疫荧光（石蜡-单标）	染色含切片和拍照	需实验前商定拍照倍数及视野
	免疫荧光（石蜡-双标）	染色含切片和拍照	需实验前商定拍照倍数及视野
	免疫荧光（冰冻-单标）	染色含冰冻切片和拍照	需实验前商定拍照倍数及视野
	免疫荧光（冰冻-双标）	染色含冰冻切片和拍照	需实验前商定拍照倍数及视野
	抗体代购		详情请咨询工作人员
Tunel	Tunel(POD自带试剂盒)	染色含切片	细胞凋亡染色，客户需提供Tunel试剂盒
	Tunel(公司提供试剂盒)		细胞凋亡染色，公司提供罗氏POD Tunel试剂盒
	凋亡试剂盒代购	染色含切片	详情请咨询工作人员

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