| 出品公司: | ATCC |
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| 细胞名称: | ATCC CRL-2064(DMS 153), DMS 153,DMS153 ,人小细胞肺癌细胞 |
| 存储人: | OS Pettengill, G Sorenson |
| 种属来源: | 人 |
| 组织来源: | 肺 |
| 疾病特征: | 肺癌 |
| 细胞形态: | 圆形 |
| 生长特性: | 悬浮生长 |
| 培养基: | DMEM培养基，90%；FBS，10%。 |
| 产品目录号: | CRL-2064 |
| 生长条件: | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, |
| 传代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 |
| 支原体检测: | 阴性 |
| 安全等级: | 1 |
| 参考文献: |
Pettengill OS, et al. Isolation and growth characteristics of continuous cell lines from small-cell carcinoma of the lung. Cancer 45: 906-918, 1980. PubMed: 6266631
Hay, R. J., Caputo, J. L., and Macy, M. L., Eds. (1992), ATCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by ATCC.
Caputo, J. L., Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988.
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1）收到细胞后当天换液，全部更换成客户自己的新鲜培养基，放进培养箱，第二天再消化。
2）边观察边消化，根据细胞的形态，终止消化时间，采取以半分钟间隔吹打细胞边缘，如可吹打下来，即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3）随细胞有一份细胞操作说明书，请客户仔细查看。
4）记得加1%双抗，降低被污染的概率。另外尽早冻存留种，以备后用。
5）售后时间为一周，QC检测合格后发货保证细胞状态良好，收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈，会有技术同步指导操作协助解决，如仍未养活免费重发。
6）收到细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请您务必重视。
7）刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。
（其中1,2条针对于贴壁细胞，悬浮细胞详情请见细胞操作说明书）
ATCC CRL-2064细胞传代操作步骤：
（一）贴壁细胞传代
1）提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2）吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3）加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4）用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5）将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
（二）悬浮细胞传代
1）将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2）弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3）将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
细胞常见问题及解决方案：
1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。3）对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
4）对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
一毫升小管操作方法 小管内也是此细胞：
1. 用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）。
2. 严格无菌操作，用吸管吸出管中细胞至9ml完全培养基混匀。
3. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。
4.换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO7 培养。
ATCC CRL-2064细胞培养的环境：
1.无污染环境：化学污染，微生物污染。
2.温度环境：37℃。偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强。
3.气体环境：95%空气加5%二氧化碳。
4.酸性环境：大多数细胞的适于PH为7.2-7.4,细胞耐酸性比较耐碱性大一些。
5.细胞培养基：合成培养基，天然培养基。
