DNA分选磁珠(完美替代AMPure XP Beads)

文献支持DNA分选磁珠(完美替代AMPure XP Beads)

价格: ¥296

品牌:翌圣生物(Yeasen) 品牌认证

货号:12601ES03

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产品详情

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保存条件 :4℃

保质期 :有效期1年

英文名 :Hieff NGSTM DNA Selection Beads(Superior AMPure XP Alternative)

库存 :大量

供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司

CAS号 :N/A

规格 :1ml

产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分选磁珠

12601ES03

1 mL

296.00

12601ES08

5 mL

986.00

12601ES56

60 mL

6286.00

12601ES75

450 mL

26186.00

 

产品描述
 
Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心优化过的缓冲体系,可用于二代测序文库构建过程中的DNA片段分选、纯化。本产品可适用于各品牌的DNA、RNA建库试剂盒,和目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同,片段回收效率和文库大小分布均与AMPure XP Beads高度吻合。
 
运输与保存方法
 
冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!
 
注意事项
 
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)磁珠使用前须在室温平衡至少30 min。
3)80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。
4)进行长度分选时,初始样品体积需≥100μL,不足时请用超纯水补齐。样品体积太小,将导致移液误差增大,进而影响分选的准确性。
5本产品仅用作科研用途!
 
使用方法
 
1. 准备工作
将磁珠由冰箱中取出,室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。
2. 长度分选(双轮法)
长度分选操作流程如1所示,具体操作如下。

1双轮分选操作流程

1)请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀。
2)根据要求,参考1DNA溶液中加入第一轮分选磁珠,涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。
3)室温孵育5 min。
4)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心转移上清到干净的离心管中。
注意:转移上清时,请残留2 μL液体于管底,切勿全部吸出上清,避免吸到磁珠并影响分选效果。
举例:当初始体积为100 μL,第一轮使用0.8×比例,即加入80 μL磁珠,推荐吸出178 μL的上清。
5)参考1向上清中加入第二轮分选磁珠。
6)涡旋混匀或移液器吹打10次混匀,室温静置5 min。
7)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心移除上清。
8)保持离心管始终处于磁力架中,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。
9)重复步骤8。
10)保持离心管始终处于磁力架中,开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂(约5 min)。
注意:切记磁珠不要干燥时间太久,磁珠干燥过度将影响纯化效果。
11)将离心管从磁力架中取出,加入适量ddH2O(≥20 μL),涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀,室温孵育5 min。
12)将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后(约5 min),小心吸取上清至干净的管中,即完成分选。
3. DNA片段分选参考条件
通过超声法将小牛胸腺DNA进行片段化,制备100-1000 bp的Smear片段,根据表1进行双轮分选。结果使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析(2)。
1磁珠文库分选推荐比例

DNA片段大小 250-350 bp 320-420 bp 450-550 bp 550-700 bp 700-900 bp 800-1000 bp
第一轮体积比(Beads:DNA) 0.80× 0.70× 0.60× 0.55× 0.50× 0.45×
第二轮体积比(Beads:DNA) 0.20× 0.20× 0.20× 0.15× 0.15× 0.15×

注:表中“×”表示样品DNA体积。如文库插入片段长度为250 bp,样品DNA体积为100mL,则第一轮分选磁珠使用体积为0.80×100 mL=80 mL;第二轮分选磁珠使用体积为0.20×100 mL=20 mL。

2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
Smear fragments溶于ddH2O,使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠进行片段分选
HB220528

翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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