小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13

小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13

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品牌:atcc,sciencell

货号:KL-XB-0051

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库存 :充足

物种来源 :小鼠

运输方式 :活细胞/冻存管

规格 :详情电联

中文名:小鼠肾小球系膜细胞
英文名:SV40 MES 13

细胞常规培养及传代

<1>细胞培养
①细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5% CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件。
②细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。

<2>细胞传代(以下步骤适用于10cm皿)
①细胞培养至密度达80%以上时即可传代,先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好,其他培养基全部吸干舍弃;
②培养皿加入2-3mL无菌PBS,轻轻晃动皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍弃;
③加入1mL胰酶,轻轻晃动皿,使胰酶浸没到皿底所有部位,将皿盖好放入培养箱中消化;
④3min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞不再贴壁,即可加入第一步收集的培养基混匀;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至不贴壁为止;
⑤将细胞悬液均匀分成几份,分别加入不同培养皿中,补加新培养基后放回培养箱培养。

<3>相关问题
①部分细胞在传代后时,会有以下现象:细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、培养基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时,可以咨询本公司技术人员此现象是否正常及相关处理方式,不要频繁换液,大多数细胞1周换液2-3次即可。
②细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善。
③传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代。传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。
④细胞状态不好或者生长极慢的时候,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。
⑤请不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化。
⑥使用进口或者活力较强胰酶的客户请注意,消化过度或者吹打过于剧烈会导致细胞受损,从而导致细胞不贴壁或者死亡产生碎片,进而生长缓慢。应注意不要消化过长时间,建议1分钟以内(约30-40s),终止也要彻底,至少6倍胰酶体积的完全培养基终止,终止之后离心去除胰酶后再用新的培养基重悬后传代。

上海柯雷生物科技有限公司

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