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文献和实验
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注册证号 :-
保存条件 :-20℃冻存
保质期 :24个月
英文名 :MALBAC® Single Cell DNA Re-Amp Kit
库存 :≥50盒
供应商 :亿康基因
CAS号 :-
规格 :50rxns
亿康基因MALBAC® 全基因组重扩增试剂盒是MALBAC®单细胞全基因组试剂盒的补充产品。本产品相比于其他的全基因组扩增方法,在扩增的均一性、覆盖度和重复性等参数具有明显优势。能够从1~10ng的单细胞扩增产物(例如,MALBAC、MDA或SurePlex等扩增后产物)中有效扩增出1~3 µg的DNA产物。重扩增产物可应用于多个分析平台,如qPCR, array CGH, SNP array, Sanger测序和高通量测序等。现已成功用于肿瘤,神经,生殖,干细胞,宏基因组学等研究领域。【规格成分】
成分 | 规格及数量 50rxns |
Re-Amp Buffer | 1500 μL × 1支 |
Re-Amp Enzyme Mix | 40 μL × 1支 |
【储存条件和有效期】
本产品储存于-20°C;避免反复冻融,有效期为 24 个月。反复冻融将会降低试剂盒性能和保质期,如需多次使用,建议分装保存。
【操作步骤】
1. 根据反应的数量,混合 Re-Amp Buffer 和 Re-Amp Enzyme Mix,用于重 扩增反应。配制多个反应体系时,总体积应至少多出 10%用于分装。
本产品储存于-20°C;避免反复冻融,有效期为 24 个月。反复冻融将会降低试剂盒性能和保质期,如需多次使用,建议分装保存。
【预期用途】
本产品仅供科学研究使用,不得用于临床诊断或其他用途。【安全信息】
利用 MALBAC®单细胞全基因组重扩增试剂盒进行实验操作时,请穿着实验服,戴好一次性手套和防护眼镜,务必做好防护措施。如需要更多信息,请查阅 材料安全数据表。【需要用户自备的仪器和耗材】
a) PCR 仪 | b) 涡旋振荡器 |
c) 0.2 mL PCR 管 | d) 离心机 |
e) 移液器、吸头 | f) 无核酸酶水 |
【操作步骤】
1. 根据反应的数量,混合 Re-Amp Buffer 和 Re-Amp Enzyme Mix,用于重 扩增反应。配制多个反应体系时,总体积应至少多出 10%用于分装。
组分 | 用量 |
Re-Amp Buffer | 30 μL |
Re-Amp Enzyme Mix | 0.8 μL |
总量 | 30.8μL |
2. 将新鲜配制的重扩增混合物 30.8ul 与 1-2ul(1-10ng)的 MALBAC®扩增
产物充分混匀,简短离心。
3. 在预热的 PCR 仪中孵育样本,条件如下:
温度 | 时间 | 循环 |
94 °C | 30 s | 1 |
94 °C | 30 s | 10-15* |
58 °C | 30 s | |
72 °C | 3 min | |
72 °C | 5 min | 1 |
4 °C | Hold | 1 |
4.重扩增产物纯化,使用 realtime qPCR 技术进行定量,Ct 值大于 28 为合格 于或者使用 Qubit2.0 荧光计定量,产物终产量为 2-5μg 为合格。
5.取 5ul 扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳(1%琼脂糖凝胶,110V,25-35 分钟), 扩增产物大小为 300~2000bp.
6. 重扩增产物放置于-20℃保存,进行后续实验。
【技术支持信息】
如需技术支持和其他服务请与亿康基因科技有限公司联系。 亿康基因科技有限公司
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