产品详情
文献和实验
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保存条件 :常温
保质期 :12个月
库存 :10000
规格 :50T
产品特点:
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
产品介绍:
产品名称:血液基因组DNA快速提取试剂盒
货号/规格:KR008F/50次
第一类医疗器械产品备案号:浙甬械备20160075
本试剂盒为从血液中提取基因组DNA提供一种高质量、快速、高效的方法,适用于含有抗凝剂的人类及哺乳动物血液。
试剂盒中的离心吸附柱采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,高效、专一吸附DNA, 可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大、纯度高,质量稳定可靠,可直接应用于PCR、Q-PCR、酶切、文库构建、Southern杂交等下游实验。
使用本试剂盒可从0.2 mL人全血中提取得到不低于3μg基因组DNA(根据血液样本中白细胞量的不同,DNA产量有所差异),OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。
使用说明:
【产品内容】
货号 | 产品组成 | 规格 | 保存条件 |
KR008F (50次) |
裂解液 BL | 14 mL | 室温 |
KR008F (50次) |
洗涤液BWB1 | 12 mL | 室温 |
KR008F (50次) |
洗涤液BWB2 | 9 mL | 室温 |
KR008F (50次) |
洗脱液 TE | 6 mL | 室温 |
KR008F (50次) |
DNA吸附柱 | 50支 | 室温 |
KR008F (50次) |
收集管2-mL | 50支×2 | 室温 |
KR008F (50次) |
无核酸酶污染离心管1.5-mL | 50支 | 室温 |
KR008F (50次) |
Proteinase K | 2.5 mL | -20℃ |
*已充分考虑到每次吸取试剂时的损耗,试剂有效期为12个月。
【使用前注意事项】
1.试剂盒中Proteinase K于-20℃保存。
2.第一次使用前应在洗涤液BWB1中加入18 mL无水乙醇。
3.第一次使用前应在洗涤液BWB2中加入21 mL无水乙醇。
4.需自备若干无核酸酶污染的离心管,本试剂盒提供的50支无核酸酶污染的离心管仅用于收集最终提取的DNA溶液。
5.推荐使用EDTA作为抗凝剂。加入抗凝剂的血液样本在2-8℃最多保存10天,保存时间过长将导致DNA降解,提取得率降低。
6.加入抗凝剂的血液样本可置于-80℃长期保存。尽量避免将血液样本反复冻融,否则将导致提取的片段较小且得率降低。
7.裂解液BL在室温较低时可能出现结晶,可于37℃水浴溶解。
【操作步骤】
1.取含抗凝剂的血液200 μL加入到离心管中(自备),加入50 μL Proteinase K,吹吸混匀或涡旋振荡10s混匀。
注意:血液与酶须混合均匀,避免裂解液BL和酶直接接触。
2.在离心管中加入250 μL 裂解液BL,涡旋振荡10s混匀。
3.室温静置10 min 充分裂解细胞。
注意:当室温低于20℃时,建议静置时间延长至15min。
4.在离心管中加入200 μL 无水乙醇,涡旋振荡10s混匀。
5.将DNA吸附柱置于2-mL收集管中,将上述溶液(700μL)全部转移到DNA吸附柱中,13,000 rpm离心1 min,弃滤液和收集管。
6.将DNA吸附柱置于新的2-mL收集管中,向DNA吸附柱中加入500 μL洗涤液BWB1,13,000 rpm离心1 min,弃滤液。
注意:初次使用前需向洗涤液BWB1瓶中加入18 mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。
7.将DNA吸附柱重新放回2 mL收集管中,加入500 μL洗涤液BWB2,13,000 rpm离心1 min,弃滤液。
注意:初次使用前需向洗涤液BWB2瓶中加入21 mL的无水乙醇,并充分振荡混匀。
8.将DNA吸附柱置于新的1.5-mL无核酸酶污染的离心管中(本试剂盒提供),于室温静置或超净工作台风干3-5 min,以彻底挥发残余的乙醇。
注意:残留的乙醇可能会影响后续的PCR等实验。
9.向吸附柱柱膜中央上方小心加入50-100 μL 洗脱液TE (此步骤请谨慎操作,枪头请勿接触柱膜),室温静置1-3 min,13,000 rpm 离心1 min。洗脱液即为DNA溶液。
注意:TE体积不应少于35 μL,体积过小影响回收效率;TE溶液含10mM Tris-HCl,1mM EDTA pH8.0;根据后续实验需求,此步骤也可以用无核酸酶污染的纯水洗脱;洗脱液经65℃温浴后可提高洗脱效率。