组织芯片

服务名称 ：组织芯片/微阵列定制技术服务

提供商 ：晶莱生物

规格 ：组织芯片/微阵列服务

实验技术简介：
【晶莱生物】组织芯片(tissue chip)，也称组织微阵列 (tissue microarrays)，是生物芯片技术的一个重要分支，组织芯片技术是将几十至 上千个小组织切片集中于一张载片上形成的缩微组织阵列，具有体积小、信息含量高、高效低耗和可比性强的优点。该技术问世十余年以来以其大规模、高通量、标 准化等优点得到大范围的推广应用。组织芯片与基因芯片和蛋白质芯片一起构成了生物芯片系列，使人类第一次能够有效利用成百上千份组织标本，在基因组、转录 组和蛋白质组三个水平上进行研究，被誉为医学、生物学领域的一次革命。组织芯片技术可以与其他很多常规技术如免疫组织化学(IHC)、核酸原位杂交 (ISH)、荧光原位杂交(FISH)等方法结合应用，它的应用领域正在不断地拓展。

实验操作流程：
制作组织芯片空心蜡模
利用组织芯片空心蜡模成型模具，一次成型制作组织芯片空心蜡模，具体操作如下：
1、将石蜡放入组织芯片制备系统熔蜡盘内加热熔化，熔蜡盘内放入一片适当大小的硬质光面塑料薄板。将空心蜡模成型框大口朝下平放于熔蜡盘中的塑料薄板上，调整熔蜡盘内石蜡的量，使熔化石蜡平面高出空心蜡模成型框约2 mm。
2、将无刃阵列管针管口朝下放置于组织芯片制备系统加热板上预热（70 ℃）约10 min，平稳垂直插入上述空心蜡模成型框。
3、平稳移开熔蜡盘，室温冷却石蜡数分钟，熔蜡盘中石蜡呈半凝状态时，下压空心蜡模成型框活动顶板，使其贴近蜡模成型框。
4、用小刀将空心蜡模成型框四周石蜡划离，继续室温冷却石蜡数分钟，熔蜡盘中不再有任何能流动的液体状石蜡。
5、将熔蜡盘放回组织芯片制备仪上加温数秒钟，熔蜡盘底部石蜡开始熔化时迅速整体移除阵列管针、蜡模成型框、蜡模成型框内的蜡模。
6、插入阵列管针针芯，推出并去除进入阵列管针内的石蜡，拔除阵列管针针芯，去除蜡模成型框外部残留的石蜡。
7、使用组织芯片空心蜡模拔模装置，均匀拔除阵列管针，去除蜡模成型框活动顶板以及蜡模成型框周边残留的石蜡。组织芯片空心蜡模制备完毕。组织芯片空心蜡模无需从蜡模成型框中取出。

制作组织芯片石蜡块
1、目标组织定位：组织芯片供体蜡块常规病理切片1张，片厚4μm，常规HE染色后进行组织病理诊断阅片，在组织切片的指引下，对相应供体蜡块进行目标组织定位标记。
2、 组织芯片蜡芯取材与点样：将蜡块放入适当温度的热水中预热软化片刻，应用组织芯片制备系统的芯片石蜡组织芯取样器钻取目标组织柱。目标组织柱逐一点样于 组织芯片空心蜡模中指定的位置。用实心单针逐一将目标组织柱轻轻压平，使其处于同一切片平面。将装满组织芯的蜡模平行移至一块薄铜板上，加热铜板数秒至贴 近铜板的蜡模稍加熔化，迅速移除铜板，室温冷却数秒后去除铜板。
3、二次包埋组织芯片石蜡块：芯片组织面朝下，将点好样的组织芯片蜡块连同蜡模 成型框放入盛有少量熔化石蜡的熔蜡盘中（熔化石蜡的深度约4 mm），数秒种后即可肉眼观察到熔化的石蜡浸入到石蜡组织芯与蜡模孔的间隙。移除熔蜡盘，将塑料石蜡包埋盒放于蜡模成型框上，用小勺舀取熔化的石蜡倒入包 埋盒中，室温冷却数分钟，石蜡半凝状态时用小刀划离蜡模成型框周围的石蜡。石蜡完全凝固后，复加热熔蜡盘移除二次包埋好的组织芯片石蜡块。
4、去除蜡模成型框以及塑料石蜡包埋盒周边残留石蜡，轮流加热蜡模成型框四周边框，使紧贴其边框内侧的石蜡熔化，取出成型的组织芯片石蜡块。
根据不同的研究目的，将组织芯片石蜡切片铺于净洁的或经过其他特殊处理的载玻片上，继续应用于常规HE染色、免疫组织化学染色以及原位杂交等细胞学或分子生物学检测。

实验注意事项：
客户提供：
1、实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。
2、实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加 0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。
3、实验对象为血清，则直接进入步骤3。

交付标准：
1、芯片检测数据
2、完整的实验操作规程、实验报告（含软件分析结果）以及实验材料

服务优势
1、拥有专业病理诊断医师进行阅片，对原有诊断进行确认，并统一诊断标准。
2、做到切片及供体蜡块双标记，确保组织采样的准确性。
3、采用高品质进口预制备受体蜡块，点阵排列整齐美观，并有多种规格可以选择；进口专用石蜡热稳定性佳，能确保组织芯与受体蜡块结合紧密。
4、拥有专业的病理技术员进行切片，每张切片不漏点、跳点，最终提供组织阵列完整的切片〉15套。

服务内容（价格咨询）
1、阅片服务：专业病理诊断医师进行阅片，并同步完成取样点标记，30元/例。
2、组织芯片蜡块制作
3、芯片蜡块切片
4、免疫组化染色
5、免疫组化染色结果判读

结果图例
1、制备完成的组织芯片蜡块


2、完成切片及HE染色后的组织芯片


晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验	细胞生物学	病理实验
消化系统模型	细胞培养	病理染色
胃酸分泌模型	普通细胞株	HE染色
脓毒症模型	细胞缺氧培养	油红O染色
胃溃疡模型	细胞培养+支架	番红固绿染色
胰腺炎模型	干细胞培养	Masson染色
肝纤维化模型	原代细胞分离/提取/培养	天狼猩红染色
DIO肥胖模型	细胞转染/病毒感染	PAS糖原染色
胆结石模型	Trans well共培养	阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型	细胞增殖	甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型	细胞计数	尼氏染色
急性肝损伤模型	生长曲线测定	LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型	存活曲线测定	普鲁士蓝染色
骨质疏松模型	ccK-8增殖检测	VG染色
糖尿病模型	MTT增殖检测	EVG染色
高尿酸血症模型	CFSE检测增殖-流式检测	VonKossa染色
呼吸系统模型	BrDU检测-免疫荧光法	刚果红染色
肺纤维化模型	细胞凋亡	苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型	Annexin V/PI流式检测细胞凋亡	Trap染色
急性肺损伤模型	WB检测凋亡相关蛋白	抗酸染色
哮喘模型	透射电镜观察凋亡小体	革兰氏染色
肺栓塞模型	Tunel染色(POD法,DAB显色)	AB-PAS染色
支气管炎模型	Tunel(荧光法,含试剂盒)	亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型	DNA ladder法	苯胺蓝染色
慢性肾衰模型	细胞周期	荧光 DAPI染色
急性肾衰模型	细胞显微计数	普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型	PI染色	间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型	BrdU渗入法	银染
肾炎模型	免疫荧光染色	黑色素染色
子宫内膜异位症模型	PI流式检测细胞周期	镀银染色
心血管系统模型	细胞运动	PASM 六胺银染色
冠心病模型	Transwell检测细胞迁移	VG染色
心肌梗死模型	Transwell检测细胞侵袭	富尔根染色
心脏骤停模型	细胞划痕	亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型	细胞克隆	碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型	集落形成法/稀释铺板方法	Goldner三色法染色
白血病模型	软琼脂克隆法	PAS-萘酚磺S染色
高血压模型	毛细管克隆法	改良苯酚品红染色
神经系统模型	体外实验血管生成	网状纤维染色
脑卒中模型	磁珠分选细胞	β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型	流式分选细胞	镀银染色
脑出血模型	开机费	movat五色染色
脑损伤模型	单色	维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型	双色	免疫组化
帕金森模型	CBA多细胞因子流式检测	免疫组化预式
老年痴呆模型	组织/血液细胞制备	免疫组化正式
应激模型	组织单细胞制备	免疫荧光（石蜡-单标）
骨骼疾病模型	中性粒细胞提取	免疫荧光（石蜡-双标）
骨折模型	其他样本细胞制备（如血液等）	免疫荧光（石蜡-三标）
骨缺损模型	外周血PBMC分离	免疫荧光（冰冻-单标）
风湿免疫性关节炎模型	线粒体组学	免疫荧光（冰冻-双标）
骨关节炎模型	线粒体膜电位检测-流式法	制片前处理
五官疾病模型	线粒体膜电位检测-免疫荧光法	石蜡组织包埋
眼科疾病模型	线粒体ROS生物含量检测--流式	特殊包埋（细胞、材料、眼球等）
鼻腔疾病模型	线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光	软化（肝硬化、皮肤结痂、植物等）
皮肤疾病模型	线粒体通透性转换孔（mPTP）	骨组织脱钙（小）
皮肤损伤模型	溶酶体免疫荧光法	骨组织脱钙（大）
肿瘤疾病模型	线粒体+溶酶体共定位	骨组织EDTA脱钙（小）
原位瘤模型	内质网	骨组织EDTA脱钙（大）
转移瘤模型	线粒体钙瞬时变化检测-流式	石蜡白片
皮下植瘤模型	ATP检测	细胞爬片
	ADP检测
	AMP检测
流式	DNA/RNA半定量检测	基因编辑工具
组织细胞悬液处理	pcr检测mRNA	合成（3保1）片段/质粒/引物合成
细胞处理	microRNA检测	质粒载体构建
血液标本处理	LncRNA表达量的检测	过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养	CirRNA表达量的检测	shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测	凝胶电泳	过表达慢病毒载体构建包装
双色检测	基因合成	shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡	＜300	过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期	300-1,500	shRNA腺病毒载体构建包装
	1500 - 5000	稳转细胞株
	>5000
	特殊序列
ELISA	WB	qPCR
组织匀浆处理	蛋白提取及定量一	RNA抽提
ELISA（不含试剂盒）48T/kit	WB检测一（10孔膜/指标）	mRNA引物设计及合成
ELISA（不含试剂盒）96T/kit	灰度值分析及作图一（10孔膜/指标）	miRNA引物设计及合成
ELISA（含国产试剂盒）48T/kit	蛋白提取及定量二	LncRNA引物设计及合成
ELISA（含国产试剂盒）96T/kit	WB检测二（10孔膜/指标）	CircRNA引物设计及合成
	灰度值分析及作图二（10孔膜/指标）	mRNA RT-qPCR
		miRNA RT-qPCR
		LncRNA RT-qPCR
		CircRNA RT-qPCR

收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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【晶莱生物】已开展了数千个实验外包项目。我们专注于医学课题研究，已从课题申请、方案设计、试剂采购、模型构造、标本检测、数据分析，各个环节积累了数千个成功案例经验，为数千个来自临床的科研工作者解决了大量的科研问题。更多相关实验服务信息请咨询晶莱生物