文献支持扫描及透射电镜

服务名称 ：扫描及透射电镜

提供商 ：无锡菩禾生物医药技术有限公司

规格 ：透射电镜/扫描电镜

扫描电镜
即扫描电子显微镜（SEM），利用极狭窄的电子束去扫描样品，进而通过电子束与样品的相互作用产生各种效应，原理即为利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态，常用于物质表面及断面立体结构的观察。

透射电镜
Transmission Electron Microscope,简称TEM ,透射电镜可以观察样品的内部精细结构，这些结构即亚显微结构或者超微结构。透射电镜使用的是透射电子,并收集透过样品的电子,从而提供了样品的内部结构的信息,如晶体结构、形态以及应力状态的信息。目前*先进的TEM其空间分辨率达到了pm级别。由于透射电子的要求, TEM的样品必须制备成超薄切片,通常为50-100 nm ,样品制备比较繁琐,常用的方法有超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。


透射电镜实验步骤
透射电镜生物样品的制备:
①取小于1立方毫米的组织;
②用2.5%*二醛(磷酸缓冲液配制)固定2小时, 0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次x15 min;
③1 %锇酸固定液固定2小时，0.1M的磷酸缓)冲液漂洗3次*15 min ;
④梯度Z醇进行脱水，4°C进行;
⑤包埋:使用纯*酮+包埋液(2:1 )室温处理4小时,纯*酮+包埋液( 1:2 )室温过夜,纯包埋液37°C处理3小时;
⑥固化: 37度烘箱过夜, 45度烘箱12小时, 60度烘箱24小时;
⑦超薄切片机切片,厚度在50 nm左右;
⑧3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色;
⑨透射电镜观察，拍片。

扫描电镜实验步骤
1.将细胞铺片放入PBS中清洗细胞表面;
2.将细胞铺放入片青霉素小瓶中加入4°C预冷的2.5%*二醛4°C固定过夜;
3.吸出2.5%*二醛,加入PBS中清洗3次,每次10min;
4.吸出PBS ,加入4°C预冷的1 %6锇酸4°C固定2h ;
5.吸出1%锇酸,加入PBS中清洗3次。每次10min ;
6.吸出PBS,按30%、50%、70%、 80%、 90%、 95%、 100% 顺序加入酒精，每种浓度酒精通过2次。每次15min,进行系列酒精脱水;
7.吸出酒精,加入520%的乙睛溶液,然后依次加入70%、80%、 90%、 95%、 100% 的乙睛溶液。每个浓度浸泡15min。将装有细胞铺片的青雷素小瓶放到真空镀膜台的真空装置内30-50min ,抽低真空。待其温度升至室温后放气,取出样品;
8.将装有细胞铺片的青毒素小瓶放入真空喷镀仪中,先喷碳,后喷金,喷镀应均匀;
9.扫描电镜观察。

结果展示：









实验完成周期及交付标准：
1.实验周期: 3周
2.交付标准：电镜图片、病理报告、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)


需确认的信息（客户提供）：
1.样本的种属.
2.样本类型,是组织还是细胞
3.样本数量
4.透射电镜分析要求、拍照要求或是参考文献


收费标准：
菩禾生物所有服务项目：

细胞平台	行为学检测	动物模型
原代细胞制备与培养	水迷宫检测	慢性胰腺炎模型
细胞培养、传代	十字架	肝纤维化模型
原代细胞传代培养		非酒精性脂肪肝
细胞系STR鉴定服务	动物模型	骨质疏松模型
细胞转染	小/大鼠饲养	糖尿病模型
MTT细胞增殖、活性、毒性检测	小/大鼠灌胃	眼外伤模型
CCK8细胞增殖、活性、毒性检测	兔子饲养费	青光眼模型
流式细胞凋亡检测	大鼠灌胃	烧烫伤模型
流式细胞周期检测	小鼠灌胃	短肠模型
血管形成实验（非钙染/钙染）	兔子灌胃	肾衰模型
ROS检测	腹腔/肌肉给药（大小鼠）	肾炎模型
划痕实验	腹腔/肌肉给药（兔子）	尿路结石
克隆形成实验	尿液/粪便采集	高氧/低氧损伤模型
粘附实验	血液采集
transwell实验（迁移）	TTC染色	病理平台
transwell实验（侵袭）	超声检测	组织包埋
贴壁/悬浮细胞转细胞株构建	血常规检测	冰冻/石蜡切片
耐药细胞株筛选构建	DR检测	HE染色
	骨组织切片	其他特殊染色
分子平台	microCT	全扫描拍照
载体构建	皮下瘤模型	扫描电镜
细胞/组织/血液RNA提取	移植瘤模型	透射电镜
mRNA/miRNA等引物设计	原位瘤模型	共聚焦拍照
RT-qPCR检测	心肌缺血再灌注模型
CHIP检测	门静脉高压动物模型
EMSA检测	高血压动物模型
双荧光素酶实验	心肌梗死动物模型
原位杂交	动脉粥样硬化动物模型
	脑缺血再灌注
免疫平台	肾性高血压模型
蛋白（核/膜/总）提取	主动脉弓狭窄模型
蛋白含量测定	脊髓损伤模型
Western Blot检测	背根神经节损伤模型
COIP	脑瘫模型
免疫组化/荧光	癫痫模型
	抑郁症模型
行为学检测	肾脏缺血再灌注模型
水迷宫检测	关节炎
十字架	肺气肿模型

六、实验服务流程



无锡菩禾生物是一家专业提供生物医药技术服务和细胞整体解决方案的高科技企业。拥有CMA 质量体系认证的实验室，5大技术平台（细胞平台、分子平台、免疫平台、病理平台、动物平台），以专业、严谨、求真、高效服务理念，为全国科研工作者提供一站式技术检测服务。
公司地址：江苏省江阴市砂山路85号
联系方式：0510-81608116