产品详情
文献和实验
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保存条件 :干燥密封保存
供应商 :赫澎(上海)生物
规格 :20次
不稳定性血浆铁(labile plasma iron;LPI)是血浆中非转铁蛋白结合的铁元素(non-transferrin bound iron;NTBI),常见于铁过剩(iron overload)疾病,导致细胞内铁聚集,而引起氧化损伤,破坏组织,刺激病原微生物生长。不稳定性血浆铁成为临床检测指标,以评价系统性铁过剩状况、铁毒性程度、氧化还原活性以及铁螯合剂治疗疗效,尤其是针对地中海贫血(Thalassaemia)、血色素沉着症(hemochromotosis)、反复输血、骨髓衰竭、干细胞移植、铁调素(hepacidin)缺失、膜铁转运蛋白(ferroportin)缺失、肝病、晚期肾病、糖尿病、骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndrome)等的去铁胺(deferrioxamine)、去铁酮(deferiprone)、地拉罗司(deferasirox)等的治疗效果。不稳定性血浆铁以不溶性多核氢氧化铁形式,例如柠檬酸铁或醋酸铁复合物、以及与类黄酮、氨基酸、白蛋白结合,而存在于血浆中。基于血浆或血清中非转铁蛋白结合的铁元素里具有氧化还原活性,且容易被螯合的铁成分,在低浓度抗坏血酸的存在下,催化产生自由基,通过荧光探针二氢罗丹明123(dihydrorhodamine123)反应后荧光峰值的变化(激发波长485nm,散发波长538nm),来定量分析不稳定性血浆铁的活性。产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO荧光液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO螯合液(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO标准液(Reagent E) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;HEPENGBIO反应液(Reagent B)和HEPENGBIO荧光液(Reagent C)避免光照;有效保证3月
用户自备
1.5毫升离心管:用于标准样品操作的容器
200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板:用于荧光分析的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于荧光分析
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化。HEPENGBIO荧光液(Reagent C)室温下融化,避免光照。然后进行下列操作
- 样品准备
选择一:血浆样品
- 准备好肝素或ACD抗凝管(注意:避免使用EDTA抗凝管)
- 抽取1毫升血液,置于抗凝管里
- 放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为700g(或3000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)
- 即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
选择二:血清样品
1. 准备好不含抗凝剂的储存管
- 抽取1毫升血液,置于储存管里
- 室温下,静置30分钟,直至血液凝结
- 放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为2000g(或5000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分(注意:避免触碰白色液体层)
- 即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
- 测定准备
- 准备好待测样品(例如血清或血浆样品等),置于冰槽里
- 设定好荧光分光光度仪或荧光酶标仪(温度为37℃):激发波长485nm,散发波长538nm;增益倍数100
- 准备好4个1.5毫升离心管,标记为1至4号管
- 分别加入xx微升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)到每个离心管
- 移取xx微升HEPENGBIO标准液(Reagent E)到1号管,混匀
- 小心移取xx微升1号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent E)到2号管,混匀
- 小心移取xx微升2号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent E)到3号管,混匀
- 小心移取xx微升3号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent E)到4号管,混匀
- 将1至4号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表
管号 | HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) | HEPENGBIO标准液(Reagent E) | 测定体系标准铁浓度 |
1 | xx微升 |
赫澎(上海)生物科技有限公司
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