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文献和实验
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保存条件 :干燥密封保存
供应商 :赫澎(上海)生物
规格 :20次
谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase;GST)融合蛋白(fusion protein)的,广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成,使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,作为敏感的探针,在远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验或印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验中,探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO标记液(Reagent B) 微升(用户自备)
HEPENGBIO反应液(Reagent C) 微升
HEPENGBIO酶促液(Reagent D) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;
用户自备
[γ32P]ATP 同位素:用于同位素标记
1.5毫升离心管:用于样品反应操作和保存的容器
干式恒温仪:用于标记孵育
液体闪烁计数器(liquid scintillation counter):用于同位素活性测定
实验步骤
- 准备好纯化的GST融合蛋白
- 移取xx微升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)到1.5毫升离心管
- 加入2.5微升用户自备的GST融合蛋白(总量为10微克)
- 加入xx微升HEPENGBIO标记液(Reagent B)(注意:同位素总量为10毫居里/毫升;5000居里/毫摩尔)
- 加入xx微升HEPENGBIO反应液(Reagent C)
- 加入xx微升HEPENGBIO酶促液(Reagent D)
- 枪头上下抽吸混匀
- 放进30℃干式恒温仪孵育30分钟
- 放进-70℃保存或置于冰槽里备用
- 或使用5至10微升(107CPM)标记蛋白继续后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验等
赫澎(上海)生物科技有限公司
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