产品详情
文献和实验
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保存条件 :干燥密封保存
供应商 :赫澎(上海)生物
规格 :5次
内毒素(Endotoxin)是一种脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革兰氏阴性细菌细胞膜的组成成分。在重组蛋白纯化过程中,细菌裂解释放出内毒素,伴随着目标蛋白,严重干扰后续实验。HEPENGBIO去内毒素采用了特异亲酯溶液充分有效地清除高浓度内毒素(4000至40000 EU/毫升)和其它亲脂性物质,高达99%以上效率,充分保留蛋白的抗原活性和质量。避免层析法的非特异性蛋白结合、免疫活性损失、和部分去内毒素失效以及昂贵的缺点。产品内容
HEPENGBIO去毒液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
台式离心机:用于沉淀分层
涡旋震荡仪:用于混匀反应物
恒温水槽:用于孵育反应物
平式摇荡仪:用于混匀反应物
实验步骤
- 从-70℃冰箱里取出蛋白样品,置于冰槽里融化
- 移取10毫升蛋白样品(50至100毫克蛋白总量)到15毫升锥形离心管
- 加入xx毫升HEPENGBIO去毒液(Reagent A)(注意:使用前,充分混匀HEPENGBIO去毒液(Reagent A))
- 涡旋震荡15秒
- 在4℃条件下,横放离心管,置于平式摇荡仪上孵育30分钟,速度为50RPM
- 放进37℃恒温水槽孵育10分钟,期间涡旋震荡2次
- 放进台式离心机离心10分钟,速度为10000g
- 小心取出离心管,避免震动
- 小心移取上层液相(留下1.5毫升下层液相)到新的1.5毫升离心管
- (选择步骤)根据需要,重复实验步骤7至9一次
- 保存在-70℃冰箱里备用或即刻进行后续实验
注意事项
- 本产品为5次操作
- 本产品采用特殊亲脂溶液
- 使用HEPENGBIO去毒液(Reagent A)前,充分混匀,然后使用1毫升枪头移液
- 不同样品容量的操作,建议相应调整试剂用量:样品容量与试剂用量之比为10:1
- 如果样品中内毒素含量过高,建议重复操作3次
- 血清样品采用相同操作步骤,但须无菌操作
- 100毫升菌液的平均内毒素含量可高达15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
- 去内毒素程度取决于样品中内毒素含量和样品性质(细菌来源、融合蛋白特性),可以通过多次处理,达到彻底清除的效果;如果效果不甚理想,建议使用HEPENGBIO蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒
- 经过本产品处理后的产物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
- 本公司提供系列内毒素处理试剂产品
赫澎(上海)生物科技有限公司
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