细胞脂质比色法定量检测试剂盒

保存条件 ：干燥密封保存

供应商 ：赫澎（上海）生物

规格 ：20/100次

脂类物质（LIPIDS）是一类脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇类（STEROL）物质，例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用，是膜结构的组成成分和细胞信号分子。油红O（OIL RED O），又称为27号红色溶剂（SOLVENT RED 27）、苏丹红5B（SUDAN RED 5B），是优于氢醇染料溶剂（HYDROALCOHOLIC DYE SOLVENT）的脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME DIAZO DYE）。其分子式为C26H24N4O，分子量为408.51。染色显示细胞脂类物质呈红色或深红色。在分光光度计或酶标仪上（520nm波长）可以进行定量分析脂质含量。

产品内容

HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO固着液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO净化液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO溶解液（Reagent E） 毫升
产品说明书 1份

保存方式

保存HEPENGBIO染色液（Reagent D）在4℃冰箱里，其余的保存在室温下；瓶盖密闭。HEPENGBIO染色液（Reagent D），避免光照；有效保证6月

用户自备

显微镜：用于观察细胞脂质染色情况
平式摇荡仪：用于染色萃取的混匀
比色皿或酶标板：用于比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪：用于定量检测细胞脂质含量情况



实验步骤

1. 小心抽掉多孔细胞培养板里的培养液
2. 轻轻加入适量的HEPENGBIO清理液（Reagent A）到每个培养孔里（见下表）

多孔培养板	容量
96	xx 毫升
48	xx 毫升
24	xx 毫升
12	xx毫升
6	xx毫升

1. 小心抽去清理液
2. 小心加入适量的HEPENGBIO固着液（Reagent B）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
3. 室温下孵育10分钟
4. 小心抽去固着液
5. 小心加入适量的HEPENGBIO净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
6. 小心抽去净化液
7. 小心加入适量的HEPENGBIO染色液（Reagent D）到每个培养孔里（见下表）

多孔培养板	容量
96	xx微升
48	xx 微升
24	xx 微升
12	xx 毫升
6	xx毫升

1. 在室温下静置15分钟
2. 小心抽去染色液
3. 小心加入适量的HEPENGBIO净化液（Reagent C）到每个培养孔里（见实验步骤2表）
4. 小心抽去净化液
5. 重复实验步骤12和13二次，或净化液不再显示粉红色
6. （选择步骤）置于一般光学显微镜下观察染色情况：脂滴（LIPID DROPLET）呈现深红色
7. 小心加入适量的HEPENGBIO溶解液（Reagent E）（见下表）

 

多孔培养板	容量
96	xx 微升
48	xx 微升
24	xx 微升
12	xx微升
6	xx毫升

1. 轻轻摇动培养板，直到HEPENGBIO溶解液（Reagent E）均匀分布
2. 置于平式摇荡仪，在室温下，孵育30分钟，速度为50RPM
3. （选择步骤）移入到比色皿
4. 即刻放进分光光度仪或酶标仪测读，波长为520 nm
5. 构建细胞脂质定量曲线：横座标（x轴）为细胞浓度（细胞量）；纵坐标（y轴）为样品读数（吸光单位OD值）