HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书

保存条件 ：-20℃

保质期 ：长期

库存 ：901

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

规格 ：5KU|1KU

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：M0228L
规格：5KU|1KU
特性:
siRNA 和 miRNA/miRNA 的 3´ 末端标记
概述:
HEN1 是植物 miRNA 甲基转移酶，可甲基化双链短 RNA 核糖末端。拟南芥中，miRNA 和 siRNA 的 3´ 核糖 2´ -0-甲基化就是由 HEN1 介导的。在 HEN1 突变体中，没有甲基化的 3´ 末端有 poly ( U )尾，预示 3´ 末端的甲基化可以保护小 RNA 免于尿苷化。纯化的 HEN1 既可甲基化 miRNA/miRNA 又可甲基化 siRNA 双链，特别是含有两个碱基突出的 21-24 个核苷酸的双链 RNA。HEN1 不能甲基化单链 RNA 或 DNA。
来源:
携带克隆有拟南芥 HEN1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
25 μl 反应体系中加入:1X BalbBuffer 2
[10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1mM DTT，10 mM MgCl2，( pH 7.9 @ 25℃ ) ]，128 μM S-腺苷甲硫氨酸和 500 ng miRNA 复合体，37℃ 温育。
热失活:70℃ 10 分钟。
使用注意事项:
在 25 μl 反应体系中可完全甲基化高达 500 ng miRNA 复合体或 75 pmol 3´ 末端。
SAM 使用前应用 H2O 以 1:10 的比例稀释。标记 miRNA 时，可用 2 μl [14C] SAM 代替非同位素标记的 SAM，欲提高标记比活性，可降低 miRNA 的量。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下，10 分钟将 1 pmol 甲基基团转移到双链 miRNA 上所需的酶量。
浓度:
50,000 units/ml。

关于HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·ssRNA Ladder
编号：N0362S
规格：25gel lanes
概述:
我公司提供分子量大小从 17-9,000 bp 的 RNA Marker 和 Ladder。低范围 ssRNA Ladder 适用于变性和非变性凝胶电泳中 RNA 的分子量标准。两种 ssRNA Ladder 均提供 2X 上样缓冲液，亮度加倍的条带可作为参照带。microRNA Marker 已溶于即用型变性上样液中，可用作变性聚丙烯酰胺凝胶和 Northern 杂交中的分子量标准，使用 SYBR-Gold 染料染色效果最佳。随 Marker 提供 3´ -生物素标记的 21-mer 寡核苷酸探针，可以用 γ32-P-ATP 和T4 PNK（M0201）进行标记。dsRNA Ladder 适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖电泳，作为 dsRNA和 RNAi 分析的分子量标准。
浓度:
低范围 ssRNA Ladder、ssRNA Ladder、dsRNA Ladder 的浓度为 500 μg/ml。MicroRNA Marker 浓度为12 ng/μl。

·PflFI限制性内切酶
编号：R0595L
规格：10KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
PflFl 切割产生的 DNA 片段含有单碱基的 5´突出端，比平末端更难连接。


HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书关键词：HEN1 miRNA 甲基转移酶,M0228L,美国


·SNAP-Surface Alexa Fluor 546
编号：S9132S
规格：50 nmol
特性:
荧光标记 SNAP-、CLIP-、ACP- 或MCP-tag 融合蛋白，用于细胞成像
标记物的荧光光谱波长范围从紫外（360 nm）至远红外（647+ nm）
有细胞通透性和非通透性两种标记物
概述:
我公司提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP-、ACP- 和 MCP- t ag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成；CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应，即可自我标记相应的tag 标签。细胞通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Cell）不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面，而细胞非通透性底物（SNAP- 和 CLIP-Surface）仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
ACP/MCP tag 的标记基团与辅酶 A（CoA）的磷酸泛酰巯基乙胺耦联，在 ACP 或 SFP 合成酶作用下，完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。虽然 ACP- 和 MCP-tag 使用底物相同，但反应特异性却不同，区别在于需要用不同的合成酶进行标记反应

·SacI-HF限制性内切酶
编号：R3156L
规格：10KU|10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
当盐浓度:高于 50mM 时，Sacl-HF的活性被抑制。小量制备 DNA 中残留的盐会阻碍 Sacl-HF的酶切作用。用 70% 乙醇漂洗或透析可以除去盐分。


HEN1 miRNA 甲基转移酶说明书关键词：HEN1 miRNA 甲基转移酶,M0228L,美国


·肽 N-糖苷酶 F
编号：P0704L
规格：75KU|15KU
特性:
去除糖蛋白的 N-连接糖
概述:
肽 N-糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。
来源:
从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
反应条件:
将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活:75℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂:
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40
分子量:
36,000 daltons。
质量保证:
无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。
单位定义:
1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 我公司units = 1 IUB milliunit）。
浓度:
500,000 units/ml。
注意事项:
已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

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