心脏langendorff灌流实验|药物筛选服务|靶点筛选服务

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  • 豚鼠体重350-400g,雌雄不限。腹腔注射wubabituona(30mg.kg-1)、肝素(250 u.kg-1)。麻醉生效后,先剪开腹腔,然后经膈肌于胸腔两侧剪开胸腔,止血钳夹住胸前壁,翻向头部,完全暴露出心脏,用拇指与食指轻捏心脏底部(尽量避免挤压心脏),轻轻提起,剪下心脏,尽量保留较长的主动脉。将心脏迅速置室温(18-22 ℃)的清洗液中,迅速行主动脉插管,恢复冠脉灌流。心脏悬垂于 Langendorff 灌流装置上,以 60 mmHg 压力行心脏逆行灌流。灌流液为氧合的 Krebs-Henseleit 缓冲液,温度保持在 37 °C。在左心房处剪一小口,将带有乳胶水囊的测压管经二尖瓣口插入左心室,连接压力换能器,调节囊内压为10 mmHg。MedLab3000 生理信号采集分析系统记录左心室内压力变化,分析获取左心室收缩压力 (left ventricular systolic pressure, LVSP,单位mmHg)、左心室舒张末期压力(left ventricular end-diastolic pressure, LVEDP, 单位mmHg)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax, 单位mmHg/s)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax, 单位mmHg/s)与心率 (heart rate, HR, 单位 beats/s)等数据。稳定20分钟后给药,每个浓度给药至少40分钟,记录给药前后心脏左室收缩压及最大上升速率,左室舒张期末压,收缩压,舒张压的改变。

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