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LuminolPen^TM 鲁米诺发光笔 (LuminolPen^TM HRP System, LH03-50) 为 Visual Protein 首创的 Western blotting 专用笔，内含自研墨水，可于转印膜表面标记 pre-stained protein ladder 标准蛋白质位置与实验信息，搭配化学发光试剂使用，墨水印迹可显示于影像侦测系统或是 X-ray film，用户可立即从影像上判断目标蛋白质的分子量大小。

官网连结：https://www.visualprotein.com/en/product/8/10/33

热门文章：蛋白质免疫印迹操作新趋势：LuminolPen 发光笔不仅能标注标准分子量，更能提升实验纪律
全文连结：http://www.biomart.cn/59094/news/2831443.htm

一、产品特点：

1. 世界首创的 Western blotting 专用笔
2. 提供 Western blotting 目标蛋白质的绝对分子量位置
3. 可标记各项讯息于转印膜，纪录实验信息
4. 可作为 ECL 化学发光试剂的效能判断指标
5. 使用发光剂管理WB图档，加强投稿期刊时之数据信用度

二、实验步骤：

1. 使用 Pre-stained protein ladder 与蛋白样本一同进行胶体电泳。
2. 将 SDS-PAGE 转印至 PVDF 或 Nitrocellulose membrane，转印完成后，利用滤纸 (e.g. Whatman #50) 移除转印膜上的残留液体，但需维持转印膜湿润，避免过度干燥。
3. 以 LuminolPen 标记转印膜表面的 Pre-stained protein ladder 位置，也可于空白处注记实验信息。
4. 注记完成的转印膜即可进行 Blocking 与后续 Western blotting 的实验步骤。
5. 转印膜以化學发光试剂处理后，LuminolPen 所标记的讯号即可透过底片或影像系统进行撷取。

三、实验操作图：

四、实验结果图：

五、Q&A：

Q1：LuminolPen^TM HRP System 可以使用多少次?
A1：LuminolPen HRP System (LH03-50) 的容量约可以涂写 1000 次转印膜。

Q2：不同品牌或灵敏度的 ECL 化学发光试剂都可以适用于 LuminolPen^TM HRP System 吗？
A2：LuminolPen 适用于不同品牌之高阶或低阶灵敏度的化学发光试剂，使用者第一次使用时，建议在所需记号位置先画一笔，之后使用时，可依据上次发光亮度强度，调整使用量，重复划，可以使发光亮度变强。

Q3：请问使用 LuminolPen^TM HRP System 对于底片曝光的使用者有什么优点？
A3：LuminolPen^TM HRP system 除了可以在转印膜提供分子量大小标示，也可以标示每一个样品编号、实验时间和名称并直接显示在底片上，当使用者进行大量 X-ray film 压片时，不会因为在暗房标记不便而造成压片后搞混 X-ray film 无法区分实验结果。

Q4：請問 LuminolPen^TM HRP System 如何作為 ECL 化学发光试剂的效能判断指标？
A4：在进行 Western blotting 实验时最担心得到没有影像的结果，造成无影像的其中一个原因是化学发光试剂失去活性。使用 LuminolPen 可以作为一个检测指针，间接侦测化学发光试剂是否仍具备活性，如果化学发光试剂失活，则 LuminolPen 所做的记号将无法发光。

六、Reference

1. Tsai, Yen-Yin, et al. "Identification of the nanogold particle-induced endoplasmic reticulum stress by omic techniques and systems biology analysis." ACS nano 5.12 (2011): 9354-9369.

2. Chen, Han-Min, Ching-Yu Lin, and Vinchi Wang. "Amyloid P component as a plasma marker for Parkinson's disease identified by a proteomic approach." Clinical biochemistry 44.5 (2011): 377-385.

3. Chiu, Cheng‐Di, et al. "Investigation of the effect of hyperglycemia on intracerebral hemorrhage by proteomic approaches." Proteomics 12.1 (2012): 113-123.

4. Pei-Jung Katy Chung, et al. “microRNA-205 targets tight junction-related proteins during urothelial cellular differentiation.” Molecular & Cellular Proteomics (2014) 13, 9: 2321-2336

5. Rahman, Md, et al. "Comprehensive Proteomic Analysis Revealed a Large Number of Newly Identified Proteins in the Small Extracellular Vesicles of Milk from Late-Stage Lactating Cows." Animals 11.9 (2021): 2506.