荧光素酶报告基因检测

荧光素酶报告基因检测

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服务名称 :荧光素酶报告基因检测

提供商 :沃登医学

荧光素酶报告基因检测

一、荧光素酶报告基因检测服务介绍

荧光素酶报告基因检测是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法

二、荧光素酶报告基因检测服务内容

1)用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。
3)筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
4) 扩增转录因子质粒,提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照,提纯备用。
5) 培养293(或其它目的细胞),并接种于24孔板中,生长10-24小时(80%汇合度)。
6) 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
7)提取蛋白并用于荧光素酶检测。
8) 加入底物,测定荧光素酶的活性。
9) 计算相对荧光强度,并与空载对照比较。



三、荧光素酶报告基因检测服务说明
1.客户提供:含有荧光素酶报告基因的重组质粒(如需公司提供请说明)。
2.服务周期:3-4周
3.若另有疑问请致电本公司咨询,我们将竭诚为您服务。

四、荧光素酶报告基因检测质量承诺
1.权威的鉴定报告;
2.原始的实验数据;
3.详细的实验步骤。

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