虾碱性磷酸酶 Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP)

保存条件 ：-20℃保存

保质期 ：有效期1年

英文名 ：Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1U/μl)

库存 ：大量

供应商 ：翌圣生物科技(上海)股份有限公司

CAS号 ：点击查看

规格 ：250U

Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl) 虾碱性磷酸酶,本品为虾来源的碱性磷酸酶，可以降解几乎所有磷酸单酯，但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化，无论末端为粘端，还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTPs，用于后续测序和SNP分析。

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl) 虾碱性磷酸酶	20429ES72	250U	-20℃	656.00

产品描述
Alkaline Phosphatase，中文名碱性磷酸酶，可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除，常用于阻止载体的自连作用：在分子克隆实验中，DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团，因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止，提高了目的片段插入率。另外，碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板，以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。

产品组分

组分编号	组分名称	规格
20429-A	Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) (1U/μl)	250U
20429-B	10×rSAP buffer	1.25ml

产品性质

来源（Source）	携带北极虾（Pandalus borealis）碱性磷酸酶基因表达质粒的毕赤酵母
分子量（Molecular Weight）	单体分子量54 kDa；rSAP为同源二聚体。
质量控制（Quality Control）	无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
比活（Specific Activity）	～3000U/mg
纯度（Purity）SDS-PAGE	＞95%
热灭活（Thermal Inactivation）	65℃温浴5 min，活性完全不可逆丧失
储存液条件（Storage conditions）	25mM Tris-HCl (pH7.5), 1 mM MgCl2,50% Glycerol
活性定义（Unit definition）	37℃条件下，1ml反应体系中1min内能水解(p-nitrophenylphosph- ate)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。

运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存。

注意事项
1）本品同其他碱性磷酸酶类似，具有Zn²⁺和Mg²⁺依赖性，本品配方中酶活性中心有紧密结合的锌原子，反应中无需再次补充。
2）金属离子螯合剂（如EDTA）、无机磷酸盐等会抑制该酶活性。单价盐离子会使活性增强。
3）DTT、β-ME等还原剂存在时，该酶活性会降低。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列试剂*：

DNA 片段**	1pmol
10×rSAP buffer	2µl
Shrimp Alkaline Phosphatase (1U/μl)	1µl
无菌ddH2O	Up to 20µl

【*】：可根据比例相应放大反应体系。
【**】：1 pmol DNA片段量约相当于1ug 3kb大小的质粒。
② 混匀上述试剂，于37℃孵育30min。
③ 将EP管65℃，5min温浴，终止反应。
【注】：也可直接向酶切体系中加入rSAP酶进行去磷酸化（按每1pmol DNA末端加入1U的rSAP），37℃温浴30-60min，并热失活rSAP和限制性内切酶。如果内切酶不能被活化，建议将DNA进行纯化。