羟甲基化DNA定量试剂盒（比色法）

羟甲基化DNA定量试剂盒(比色法)(48次分析) 货号：P-1036

MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit (Colorimetric) (48 assays)

背景资料：MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(比色法)提供了***优化的缓冲液和试剂，运用比色度的方法，通过检测微孔板上5-hmC的水平，以定量检测全基因组的DNA羟甲基化水平。而没有甲基化和未甲基化胞嘧啶的结合活性。本试剂盒与MethylFlash DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法)能够完美配合，用来同时定量检测DNA的甲基化和羟甲基化水平。
MethylFlash甲基化DNA定量试剂盒(比色法)是我们以前的Methylamp全基因组DNA 甲基化定量试剂盒的改进版，简化了工作流程，去掉了平板干燥和阻断两个步骤，并提高了结果的稳定性。本试剂盒使用了一种新的方法把背景信号降到***低，并去掉了平板干燥和阻断两个步骤。与基于套色板的方法相比(比如HPLC或者质谱)，本产品检测5-mC更加划算和精确。

试剂盒有以下优点和特征：
方便快捷的比色法，易操作，完成整个实验不超过4小时
试剂盒中的新成分将背景信号降至***低，不对平板进行模块化，分析操作更简单，结果更精确可靠，也更稳定。
高灵敏度，检测极限为0·2 ng的甲基化DNA。
优化的抗体和加强溶液，能高度专一的识别5-mC，而不会与未甲基化的胞嘧啶结合，在特定浓度的DNA样品中几乎不会结合羟甲基化的胞嘧啶。
试剂盒中有普遍适用的阳性对照和阴性对照。
96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量。水平。

关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的，由胞嘧啶修饰而来。5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。尽管到现在为止还不确知其功能，有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息，也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。在EPI公司的MethylFlash技术之前，我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC

5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序，这些技术都不适合用来检测5-hmC，因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。为了解决这个问题，EPIk研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶，并且区分5-hmC, 5-mC, 和 C，使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息，也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化

产品描述：DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法)中含有定量检测全基因组羟甲基化所必需的所有试剂。在检测实验中，DNA被固定在一种有DNA吸附能力的孔上，羟甲基化的片段会被捕获剂以及检测抗体识别，用分光光度计读取微孔板在450nm处的比色度定量。羟甲基化的DNA的量与OD值成线性关系，可以通过本试剂盒提供的方程来计算两种不同的羟甲基化DNA样品的相对羟甲基化状态或者通过标准曲线完全定量5-mc。基于其工作原理和微孔板模式，本试剂盒可以用于各种物种来源的多种样品形式，包括培养的细胞、新鲜和冷冻的组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样品以及体液样品。本试剂盒曾经对来自小鼠大脑和海拉细胞系的样品成功地进行了5-hmC的定量，所得到的结果与用HPLC和LC-MS的方法相当。通过使用本试剂盒，研究者们首次在正常人类脑部组织和结肠组织中发现了高丰度的5-hmC。同时，研究结果还显示，正常人类脑部组织和结肠组织中5-hmC分别占总甲基化胞嘧啶(5-mC和5-hmC的总和)的32%和16%。相反，在结肠癌细胞系(HCT116)和宫颈癌细胞系(HeLa)中，5-hmC的比率很低，几乎没有。
产品特点：

1·整个比色法检测实验的操作简单易学，方便快捷，只需要3小时45分钟就能完成实验。96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量；

2·试剂盒中提供通用阳性和阴性对照，能用于定量检测各种来源的DNA样品中的羟甲基化状态，包括哺乳动物、植物、真菌、细菌以及病毒；

3·试剂盒中含有定量检测全基因组DNA羟甲基化实验所有用到的试剂，包括阳性和阴性对照。直接测定荧光强度的方法来进行定量检测取代了已过时的和劣质的方法，无须DNA消化/变性、提取，不用使用套色版，不接触放射性材料；

4·试剂盒用到的新方法和专利试剂使得羟甲基化DNA定量实验结果精确、高度灵敏特异，检测极限为40 pg的羟甲基化DNA，检测范围宽至40 pg 到 20 ng，检测灵敏度是HPLC的十倍(0·008% vs 0·08%)，不与DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反应，特异检测5-hmC。