细胞增殖（MTT或CCK8）技术服务

服务名称 ：细胞增殖（MTT或CCK8）技术服务

细胞增殖（MTT或CCK8）技术服务

本公司承接细胞增殖技术服务，包括细胞毒性实验、评价药物的安全性一些蛋白分子、细胞因子的活性检测等。客户需要提供相关的实验设计：包括作用时间、样本浓度等。

服务项目：

1、检测细胞活性：细胞毒性实验；

2、药物的筛选：包括药物剂量及给药时机的筛选，评价药物的安全性等；

3、一些蛋白分子、细胞因子的活性检测。

具体操作：

1、对数生长期的贴壁细胞，用胰酶消化后，根据细胞大小，按照1×10³～5×10⁴细胞/孔接种于96孔板，使用的培养基为细胞的完全培养基；

对数生长期的悬浮细胞，离心收集后，根据细胞大小，按照1×10³～5×10⁴细胞/孔接种于96孔板，使用的培养基为细胞的完全培养基；

2、 将96孔板置于37℃、5%CO2湿度培养箱中培养24小时后，进行处理：

分别设立阴性对照、阳性对照和实验组，每一样本的每一浓度平行三复孔；

3、将96孔板重新置于37℃、5%CO2湿度培养箱中继续培养，根据实验的要求，分别于不同的时间点（24h、48h、72h或96h）进行MTT或CCK8检测；

4、贴壁细胞的MTT检测：

（1）每孔加入20μl的5mg/ml的MTT，于37℃、5%CO2湿度培养箱中温育4小时；

（2）轻轻吸去上清液，每孔加DMSO 200μl，振荡器振荡10min，酶标仪测定光密度值(OD)；

悬浮细胞的MTT检测：

（1）每孔加入20μl的5mg/ml的MTT，于37℃、5%CO2湿度培养箱中温育4小时；

（2）1500rpm×5min离心，轻轻吸去上清液，每孔加DMSO 200μl，振荡器振荡10min，酶标仪测定光密度值(OD)；

悬浮细胞的CCK8检测：

（1）每孔加入5～10ml的CCK8检测试剂，于37℃、5%CO2湿度培养箱中温育2～4小时；

（2）酶标仪测定光密度值(OD)；

5、进行相关统计分析；

说明：对于悬浮细胞，客户可选择采用MTT法或CCK8法。

实验周期：3~4周