HM10205-S HumanInterleukin 6 (IL-6) ELISA Kit

库存 ：大量

供应商 ：Bio-Swamp Life Science Lab

检测限 ：见说明书

检测方法 ：ELISA

应用 ：酶联免疫吸附测定

适应物种 ：Human

标记物 ：HRP

样本 ：血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本

用途

本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中白细胞介素6（IL-6）的含量。

检测原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素6（IL-6）水平。用纯化的白细胞介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入含有白细胞介素6（IL-6）的样本，再与HRP标记的白细胞介素6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6 （IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中白细胞介素6（IL-6）。

特异性

可检测样本中的人白细胞介素6（IL-6），且与其它相关蛋白无明显交叉反应

重复性

板内变异系数≤9%,板间变异系数≤11%

试剂盒组成及保存

试剂盒组成	96 孔配置
说明书	1 份
封板膜	4 片（96）
96 孔酶标板	1×96
检测抗体(Detection Antibody)	50μL×1 支
酶标试剂(Enzyme Reagent)	50μL×1 支
标准品(Standards)：0.8ng/vial	1 支
测定稀释剂(Assay Diluent)	25 ml×2 瓶
显色剂A 液(Substrate Solution A)	6 ml×1 瓶
显色剂B 液(Substrate Solution B)	6 ml×1 瓶
终止液(Stop Solution)	6ml×1 瓶
浓缩洗涤液(Wash Buffer )	（50ml×10 倍）×1 瓶

保存温度：2-8°C

实验室所需物品

需要而未提供的试剂和器材

1.吸光度值在450nm波长下检测的酶标仪

2.1-2ml的加样器

3.100 ml和1L的量筒

4.吸水纸

5.37°C 恒温箱

6.蒸馏水或去离子水

7.数据分析和绘图软件，图纸

8.标准和样品稀释的试管‍

操作步骤

1.标准制备：测定稀释剂稀释不同梯度标准备用（详见试剂制备）；

2.加样：分别设标准孔、空白孔、待测样品孔。在酶标包被板标准孔中先加标准100μL，样本孔中加待测样品100μL。加样注意加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。用封板膜封板后置室温孵育2 小时；

3.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干；

4.加酶：每孔加入酶标二抗100μL，空白孔除外；用封板膜封板后置室温孵育1 小时；

5.洗涤：操作同3；

6.显色：每孔先加入显色剂A50μL，再加入显色剂B50μL，轻轻震荡混匀，室温避光显色15分钟；

7.终止：每孔加终止液50μL，终止反应（此时蓝色立转黄色）；

8.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后30 分钟以内进行。

参考文献