GV3101农杆菌感受态细胞

保存条件 ：-80℃

规格 ：10*100ul

GV3101感受态细胞

GV3101农杆菌感受态细胞具有利福平和庆大霉素抗性，适用于拟南芥、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

操作方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上或室温融化。
2.每100μl感受态加1ug质粒DNA混匀，依次于冰上静置10分钟、液氮5分钟、37℃5分钟、冰浴5分钟。
3.加入700μl无抗生素的2YEB或LB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的2YEB或LB平板上，28℃培养2-3天。
5.根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的YEP或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于28℃直至液体被吸收，倒置培养，28℃培养2-3天。

注意事项
1.感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2.转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3.感受态细胞最好在冰上融化。
4. 混入质粒时应轻柔操作。
5. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。