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服务名称 :腺病毒包装服务
提供商 :深圳市今发展生物
腺病毒包装技术腺病毒表达系统,可以通过可复制的缺陷腺病毒颗粒,感染分裂或非分裂的哺乳动物细胞,介导外源核酸片段进入并在细胞内瞬时表达。本系统以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架,在克隆、包装、扩增等方面做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、产毒迅速、滴度高等效果。所包装的腺病毒已成功应用于信号转导,基因转位,Co-IP,动物实验,干细胞研究等科研实验。
系统组成: |
u 表达载体:包括pENTR和Ad载体,可表达cDNA,miRNA,shRNA,lncRNA等;
u 293A 细胞株:能够在表达载体转染后包装出腺病毒;
u 可以根据需要,选择组成型或诱导型表达载体。
系统优势:
u 包装容量大:包装容量可以达到8kb;
u 宿主范围广:可以广泛感染分裂和非分裂的哺乳动物细胞;
u 病毒滴度高:未浓缩的病毒原液病毒滴度可高达1 X 1010 pfu/ml;
u 病毒可扩增:包装好的病毒可以在293A细胞系中进行扩增。
腺病毒包装流程:
腺病毒载体选择:
一)、目的蛋白基因慢病毒过表达载体
Vector Cat# | FM No. | Promoter | Feature |
pEA100 | CMV | CMV-cDNA-polyA, no tag | |
pEA101 | CMV | CMV-FLAG-cDNA-polyA | |
pEA102 | CMV | CMV-HA-cDNA-polyA | |
pEA103 | CMV | CMV-cMyc-cDNA-polyA | |
pEA104 | CMV | CMV-cDNA-P2A-EGFP-polyA | |
pEA105 | CMV | CMV-cDNA-P2A-RFP-polyA | |
pEA106 | TETO6* | TETO6-cDNA-Ubc-rtTA3 |
二)、pri-miRNA腺病毒过表达载体
Vector Cat# | FM No. | Promoter | Feature |
pEA200 | CMV | CMV-EGFP-miRNA | |
pEA201 | CMV | CMV-RFP-miRNA | |
pEA202 | TETO6* | TETO6-RFP-miRNA-Ubc-rtTA3 |
三)、dTuD (miRNA抑制体) 腺病毒过表达载体
Vector Cat# | FM No. | Promoter | Feature |
pEA210 | #3563 | U6/H1 | TuD-U6-H1-TuD-EF1a-copGFP-polyA |
pEA211 | U6/7sk | U6-TuD-TuD-7sk- EF1a-copGFP-polyA | |
pEA212 | U6/7sk | U6-TuD-TuD-7sk- EF1a-RFP-polyA | |
pEA213 | U6/7sk | U6-TuD-TuD-7sk |
四)、shRNA 腺病毒干扰载体(靶向mRNA or lncRNA)
Vector Cat# | FM No. | Promoter | Feature |
pEA300 | #3563 | U6 | U6-shRNA-CMV-EGFP-polyA |
pEA301 | mU6/7sk | mU6-shRNA1-shRNA2-7sk-CMV-EGFP-polyA | |
pEA302 | CMV | CMV-EGFP-miR30shR-polyA |
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