SWATH定量技术

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服务名称 :SWATH定量技术



SWATH定量技术
SWATH(Sequential Window Acquisition of all Theoretical fragmentions)定量技术,将整个质谱扫描质量范围分为若干窗口,依次对每个窗口的所有离子进行碎裂,采集全部子离子信息。该技术无需指定目标肽段,扫描点数均匀,利用谱图库即可实现定性确证和定量离子筛选,同时可实现数据回溯。

应用领域
适用于多生物样本中的蛋白质组非标定量比较,差异蛋白质的发现。

技术优点:
1.相比DDA技术的非标定量结果,定量重现性和准确度更高。
2.定量蛋白质通量高,能同时实现多达3000个蛋白质的定量。

检测仪器
TripleTOF 5600,TripleTOF 6600

分析流程:
样品经胰酶酶切后,采用常规DDA质谱检测技术分析建立图谱库,之后采用SWATH方法进行质谱数据采集。定量数据采用Skyline,Peakview等软件处理。

可选择数据分析:

1.蛋白质/肽段鉴定及定量结果
2.差异蛋白质统计分析
3.蛋白质GO分析及差异蛋白GO富集分析
4.蛋白质Pathway通路分析及差异蛋白的
Pathway通路分析
5.多样品间表达模式聚类分析(适用于样
本数≥3的项目)

样品要求:
蛋白提取物:≥50 μg
细胞:≥106
组织:动物组织≥1 mg,植物组织≥10 mg
体液:血清≥5μL,脑脊液≥10μL






参考文献:
  1. Collins B C, Gillet L C, Rosenberger G, et al. Quantifying protein interaction dynamics by SWATH mass spectrometry: application to the 14-3-3 system[J]. Nature methods, 2013, 10(12): 1246-1253.
  2. Röst H L, Rosenberger G, Navarro P, et al. OpenSWATH enables automated, targeted analysis of data-independent acquisition MS data[J]. Nature biotechnology, 2014, 32(3): 219-223.
  3. Selevsek N, Chang C Y, Gillet L C, et al. Reproducible and Consistent Quantification of the Saccharomyces cerevisiae Proteome by SWATH-mass spectrometry[J]. Molecular & Cellular Proteomics, 2015, 14(3): 739-749.
  4. Schubert O T, Gillet L C, Collins B C, et al. Building high-quality assay libraries for targeted analysis of SWATH MS data[J]. Nature protocols, 2015, 10(3): 426-441.





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