Long PCR Enzyme Mix

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品牌：Thermo scientific -fermentas

货号：K0181

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Catalog#	Size, concentration	Supplied with:					Certificate of Analysis	MSDS
Catalog#	Size, concentration	10X Long PCR Buffer	10X Long PCR Buffer with 15 mM MgCl₂	25 mM MgCl₂	DMSO	Water, nuclease-free	Certificate of Analysis	MSDS
K0181	100 u (5 u/µl)	0.60 ml	0.60 ml	0.60 ml	0.30 ml	1.50 ml	K0181	SelectEnglishEnglish-USAGermanFrenchLithuanian
K0182	500 u (5 u/µl)	2 x 1.25 ml	2 x 1.25 ml	2 x 1.25 ml	1.00 ml	1.50 ml	K0182	SelectEnglishEnglish-USAGermanFrenchLithuanian

Features

两种热稳定性DNA polymerases的特殊混合物。
长片段PCR产物：
一病毒DNA模板：47 kb产物；
一基因组DNA模板：21 kb产物。
适合GC-rich(最高达85%)的模板。
保真性比Taq DNA polymerase高3倍(见图1)。
产量高。

Applications

长片段PCR 。
GC-rich或困难模板的PCR。
制备TA克隆用PCR产物。
RT-PCR。

说明

Long PCR Enzyme Mix是由Fermentas Taq DNA Polymerase和一种具有校正活性的热稳定DNA polymerase的独特混合物。两种酶协同作用扩增长片段PCR产物。扩增产量和保真性比单独使用Taq DNA Polymerase高。该混合物扩增的保真性比TaqDNA Polymerase高3倍。两种酶的比例经优化处理，可合成超长的片段(47 kb：病毒DNA 模板；21 kb：基因组DNA模板)(见图1)。特殊的Long PCR Buffer 保护DNA 在长时间热循环时不会脱嘌呤或产生缺口。绝大部分扩增产物具有3’-dA突出末端。

Long PCR Enzyme Mix可高效扩增GC-rich的DNA 序列(见图2)。

质量控制

功能测试：以Lambda DNA为模板扩增长达47.4 kb的片段。

图1。长片段DNA模板扩增。
2.5 u Long PCR Enzyme Mix扩增DNA片段(1.25 ng lambda DNA模板；50 μl反应体系)。
M – Lambda Mix Marker
1-5 – PCR 产物

图2。Long PCR Enzyme Mix 成功扩增GC-rich模板。
Long PCR Enzyme Mix和其它两个厂家的GC-rich模板专用PCR系统扩增人的IGFR II 基因(85% GC 含量)。50 μl 反应体系包括：100 ng人基因组DNA, 200 μM各种dNTP 和0.5 μM各种引物。循环条件如下：94°C, 2 min; 96°C, 10 s; 68°C, 1 min 30 s; 35 cycles; 72°C, 7 min。
M – GeneRuler™ 100 bp Plus DNA Ladder
1 – Long PCR Enzyme Mix，添加12% DMSO
2-3 – 其它厂商的GC-rich模板专用PCR体系