TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit

品牌 ：Thermo scientific -fermentas

货号 ：K0441

库存 ：大量

Features

• 产量高 一 2小时制备高达200 μg RNA。
• 可转录长片段或短片段RNA。
• 反应放大(单次)可获得毫克级RNA。
• 灵活 一 可制备标记的、非标记的或加帽的RNA。
• 试剂盒内含有RiboRuler™ 一 RNA Ladder，适合定量和产物大小鉴定。

Applications

• 体外转录。
• 体外翻译。
• 制备杂交探针，用于：
  一 基因芯片。
  一 原位杂交。
  一 印迹实验。
• RNase酶切保护分析。
• RNA结合蛋白分析。
• 反义RNA和RNA干扰。
• RNA扩增。
• 微注射研究。

说明

TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit试剂盒可以从含有T7 RNA聚合酶启动子的DNA模板(线性质粒或PCR产物)中高效体外转录制备RNA。试剂盒包含可配置50次20 μl反应体系的试剂，每个反应可在2小时内从1/μg的模板中转录制备高达200 μg RNA(见图2)。反应体系可放大制备毫克级的全长RNA。

该试剂盒可用于制备大量长片段或短片段RNA。试剂盒内含有转录所需的全部试剂，也提供RiboRuler™ High Range RNA Ladder以鉴定产物大小和产量。

质量控制

20 μl反应体系中、2小时内可从1 μg对照模板DNA中制备140-170 完整的2.2 kbRNA转录物。

组分

• TranscriptAid™ Enzyme Mix
• 5X TranscriptAid™ Reaction Buffer
• DNase I, RNase-free
• ATP Solution
• CTP Solution
• GTP Solution
• UTP Solution
• Control template
• 3 M Sodium Acetate Solution, pH 5.2
• DEPC-treated Water
• 2X RNA Loading Dye
• RiboRuler™ High Range RNA Ladder, ready-to-use
• 0.5 M EDTA, pH 8.0
• 详细的操作手册

图1。高产量全长RNA转录子。
1 μg DNA模板体外转录高效制备500、1000和6000碱基的RNA转录子(20 μl反应体系，37°C孵育2小时)。转录产物稀释80倍后取6 μl进行1%琼脂糖/TAE凝胶电泳，凝胶中添加0.5 μg/ml溴化乙啶。
M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder, ready-to-use
1, 4, 7 – 500 b RNA转录子
2, 5, 8 – 1000 b RNA转录子
3, 6, 9 – 6000 b RNA转录子

图2。RNA合成的时间累积曲线。
TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit转录制备500、1000和6000碱基RNA (20 μl反应体系，1 μg DNA模板)。上图为反应0-4小时内转录产物产量(μg)变化。使用Agilent 2100 Bioanalyzer检测不同时间点的RNA产量。

图3。短RNA合成的时间累积曲线。
TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit转录制备50和100碱基RNA。上图为反应0-8小时内转录产物产量(μg)变化。使用Agilent 2100 Bioanalyzer检测不同时间点的RNA产量。