GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit

库存 ：大量

纯化操作流程

Features

• 高效 一 可获得高达20 μg高品质的质粒 DNA。
• 快速 一 操作过程只需14分钟。
• 方便 一 无需酚/氯仿抽提或乙醇沉淀处理过程。
• 高纯度 一 纯化的DNA可立即使用。

Applications

• 快速提取高纯度质粒DNA，纯化的DNA可用于所有常规分子生物学实验，包括：
  一 FastDigest®或常规限制酶切割；
  一 自动荧光或放射性标记测序；
  一 PCR扩增；
  一 体外转录；
  一 转化；
  一 转染多种细胞系。

说明

GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit是一种简单、快速、经济的从重组大肠杆菌菌株中抽提高品质质粒DNA的系统。该试剂盒使用独特的硅膜吸附分离技术(离心柱形式)提取质粒DNA。单次抽提可获得高达20 μg的高拷贝质粒DNA。

原理

收集培养的细菌并裂解。细菌裂解离心后取上清过柱(高盐时，硅膜选择性吸附DNA分子)纯化。洗涤除去杂质污染后使用少量洗脱缓冲液或水洗脱纯化的质粒DNA。纯化的DNA可直接用于所有下游分子生物学操作，如快速和常规限制酶切割、PCR扩增、体外转录、转化和自动测序等。

质量控制

功能测试：根据操作说明书，从大肠杆菌提取pUC19 DNA。抽提的DNA质量通过质谱分析、琼脂糖凝胶电泳、限制酶切割和自动测序方法鉴定。

组分

• Resuspension Solution
• Lysis Solution
• Neutralization Solution
• Wash Solution (浓缩的)
• RNase A Solution
• Elution Buffer
• Spin Columns
• Collection Tubes
• 详细的操作手册

图1。快速克隆分析。
2.3 kb PCR 扩增片段克隆入pUC19载体。使用GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit (#K0502)从重组克隆的过夜培养液中抽提质粒DNA后再用FastDigest® EcoRI和FastDigest® HindIII于37°C双酶切5分钟。
M₁, M₂ – ZipRuler™ Express DNA Ladder Set
C – 对照pUC19 DNA经FastDigest® EcoRI和HindIII双酶切
1-6 – 重组克隆小量抽提DNA，经FastDigest® EcoRI和HindIII双酶切

图2。Electropherogram显示GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit提取质粒DNA的高品质测序数据。
使用GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit 从重组大肠杆菌菌株中抽提质粒DNA。采用T7测序引物测序质粒DNA。ABI 3730 DNA Analyzer分析测序反应。可读出长达750个核苷酸的序列。