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circRNA(环状RNA)原位杂交
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circRNA(环状RNA)原位杂交
circRNA原位杂交实验
原位杂交(ISH)是用标记的DNA或RNA为探针,根据碱基互补配对原则,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据探针的标记物是否直接被检测,原位杂交可分为直接法和间接法。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标记的探针与靶核酸进行杂交,通过放射自显影、荧光显微镜术或成色酶促反应直接显示。间接法用半抗原标记探针,通过免疫组织化学法对半抗原定位,间接显示探针与靶核酸形成的杂交体
.
DIG标记探针迅速发展。
荧光原位杂交实验流程(
FISH
)
1、脱蜡
2、蛋白酶处理
3、变性
4、杂交
5、杂交后水洗
6、检测
7、扩增
8、
封片,荧光
显微镜拍照。
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