启动子、增强子报告基因载体构建

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真核报告基因表达载体构建
双萤光素酶报告基因分析系统是结合萤火虫和海洋腔肠萤光素酶先进的共报告基因测试技术:pRL家族海肾萤光素酶(Rluc)载体提供组成性表达的海肾萤光素酶,可与一个萤火虫萤光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为使实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL载体包含一个编码海肾萤光素酶(Rluc)的cDNA,这个cDNA从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis)中克隆而来。目前有四个不同的启动子载体。其中HSV-胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK)相对较弱,在提供海肾萤光素酶报告基因载体的组成性表达时特别有用。早期SV40 增强子/启动子区域(pRL-SV40)和CMV极早期增强子/启动子区域(pRL-CMV)一般提供高水平转录,适用于实验载体带有较弱调节因子的报告基因实验。


启动子、增强子报告基因表达载体构建
构建将启动子、增强子的特定片段插入到萤火虫萤光素酶表达序列上游的报告基因质粒 ,可以方便的定量检测启动子序列的活性。

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