miRNA基因钓取

microRNA（miRNA）是一种小的内源性非编码RNA分子，大约由21-25个核苷酸组成。这些小的miRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达。miRNA途径开始于一个miRNA基因的pri-miRNA（Primary miRNA）转录本；这个70-100nt的发夹RNAs（pri-miRNA）在核内被核糖核酸酶Drosha加工处理而最终成为pre-miRNA（Precursor miRNA）;之后pre-miRNA被核输出蛋白exportin 5转运入胞质，接着被第二个核糖核酸酶Dicer消化为21-25nt的miRNA；这个阶段的miRNA可以结合RISC（RNA-Induced Sliencing Complex）并与靶标mRNA互补结合；miRNA和靶序列的互补程度决定了靶基因mRNA在翻译水平被部分抑制或被直接降解。其中过表达带有发卡结构两侧的侧翼序列（flanking sequence）的pri-miRNA会较好的模拟细胞内miRNA的发生和成熟的过程同时也具有更高的表达效率。上海生博公司可以从人、小鼠和大鼠基因组DNA中钓取pri-miRNA序列并构建进过表达载体，用于miRNA的功能的研究。
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