腺病毒包装中的难点主要在于怎么将外源基因表达框或者外源的shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。由于腺病毒骨架载体比较大（>30kb），而且载体中的一些常用酶切位点几乎都有多个，如果用常规的酶切-连接的方式将外源基因或者shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上，成功率很低，因此，目前的腺病毒表达系统基本上都是用同源重组的方法将外源基因或shRNA表达框构建至腺病毒骨架载体上。

本公司的腺病毒包装出自Invitrogen公司的BLOCK-iT™ Adenoviral Expression System，与市面上其它腺病毒包装往往利用大肠杆菌或者293细胞自身的同源重组系统不同，本公司的腺病毒表达系统采用的是Invitrogen公司的Gateway技术，即利用LR重组酶进行体外重组。与其它腺病毒表达系统相比，这种体外重组更加方便、快速，重组效率更高！此外，本公司对这套腺病毒表达系统多个部分进行了优化和改造，使得整套系统适用范围更广，鉴定更方便、准确，病毒构建及包装更快捷。

腺病毒骨架载体pAd/BL-DEST质粒图谱

穿梭载体pYr-adshuttle-1（表达基因用）质粒图谱

穿梭载体pYr-1.1-hU6-EGFP（表达shRNA用）质粒图谱

赢润生物腺病毒包装系统--穿梭载体简介

穿梭载体名称	穿梭载体特点
表达shRNA用
pYr-1.1	hU6启动子；EGFP荧光标记
pYr-1.2	mU6启动子；EGFP荧光标记
pYr-1.3	hH1启动子；EGFP荧光标记
pYr-1.4	h7SK启动子；EGFP荧光标记
pYr-2.1	hU6启动子；无荧光标记
pYr-2.2	mU6启动子；无荧光标记
pYr-2.3	hH1启动子；无荧光标记
pYr-2.4	h7SK启动子；无荧光标记
表达mirshRNA用
pYr-mir30-shRNA	CMV启动子；micro30双臂，EGFP荧光标记
表达基因用
pYr-adshuttle-1	CMV启动子；无荧光标记
pYr-adshuttle-2	CMV启动子；EGFP荧光标记，融合表达用
pYr-adshuttle-3	CMV、hEF1α双启动子，可同时表达两个基因
pYr-adshuttle-4	CMV、hEF1α双启动子；hEF1α启动子后插入EGFP荧光基因，CMV启动子后空着
pYr-adshuttle-5	CMV启动子；RFP荧光标记，融合表达用
pYr-adshuttle-6	CMV启动子；外源基因-IRES-EGFP形式
pYr-adshuttle-7	CMV、hEF1α双启动子；CMV启动子后插入EGFP荧光基因，hEF1α启动子后空着

腺病毒包装服务价格及周期（S4011）：

项目	价格	周期
表达shRNA重组腺病毒包装（1010pfu/ml滴度）
表达shRNA 重组腺病毒包装		4~5周
表达mirshRNA重组腺病毒包装（1010pfu/ml滴度）
表达mirshRNA 重组腺病毒包装		4~5周
基因过表达重组腺病毒包装（1010pfu/ml滴度）
目的基因在1.5k以内		4~5周
目的基因在1.5k~2k		4~5周
目的基因在2k~2.5k		4~5周
目的基因在2.5k~3k		4~6周
目的基因大于3k		4~6周
1010pfu/ml滴度，超过1ml
1010pfu/ml滴度，超过1ml		1~2周
腺病毒浓缩及纯化（1011pfu/ml滴度）
表达shRNA重组腺病毒		3~4周
表达mirshRNA重组腺病毒		3~4周
基因过表达重组腺病毒		3~4周
腺病毒对照（1010pfu/ml滴度）
rAd-NC-shRNA		1~2周
rAd-EGFP		1~2周
rAd-RFP		1~2周
rAd-Null		1~2周
腺病毒对照（1011pfu/ml滴度）
rAd-NC-shRNA		3~4周
rAd-EGFP		3~4周
rAd-RFP		3~4周
rAd-Null		3~4周