一步法RT-PCR试剂盒

一步法RT-PCR试剂盒是基于novaprotein公司生产的M-MuLV反转录酶（Cat.No:E123）和Taq DNA聚合酶(Cat.No:E001)，对缓冲液系统进行优化使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效，具有方便、快速、灵敏度高、重复性好等特点。该试剂 盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板，cDNA合成和PCR反应在一个管中进行，逆转录结束后可直接进行PCR循环而不用增加额外的步 骤；同时可对低至1fg的总RNA进行扩增，有助于大量样品的处理并减少污染。

• 本试剂盒M-MuLV反转录酶(Cat.No:E123)单独分装，便于客户进行无M-MuLV反转录酶的对照试验。
• 本试剂盒延伸时间为1kb/min，客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整；
• 通常情况，28-30个循环可达到最佳扩增，对于低拷贝目的基因的检测，可将循环数增加到40个。
• 如果同时操作多个样品，建议先在冰上先配置预混液，然后再分装到各个反应管中，加入模板启动反应。
• 反应出现目标条带拖带，系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致，可对模板及引物浓度等进行调整；反应出现杂带，可对退火温度进行调整，或重新设计特异性高的引物。
• 一步法RT-PCR只需使用特异性反转录引物，无需使用Random Primer和Oligo dT Primer等进行反转录反应。