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文献和实验
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服务名称 :细胞迁移
提供商 :无锡菩禾生物医药技术有限公司
细胞迁移细胞迁移即细胞划痕法,是测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移能力,实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区的修复能力,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。
当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。
细胞迁移实验步骤
1、培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记(方便拍照时定位同一个视野)。
2、细胞消化后接入12孔板,数量以贴壁后铺满板底为宜(数量少时可培养一段时间至铺满板底)。
3、细胞铺满板底后,用1ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕,尽量保证各个划痕宽度一致。(人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果, 这也是该方法最大的缺陷)。
4、吸去细胞培养液,用PBS冲洗孔板三次,洗去划痕产生的细胞碎片。
5、加入无血清培养基,拍照记录。
6、将培养板放入培养箱培养,每隔4-6小时取出拍照。
7、根据收集图片数据分析实验结果。
结果展示:
实验完成周期及交付标准:
1.实验周期: 根据样本
2.交付标准:
1、细胞划痕实验原始电子图片;100或200×3张;
2、详细实验报告,包含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
需确认的信息(客户提供):
1. 客户提供检测样本(细胞,客户提供处理好的细胞,或者我们代培养及处理细胞,则需收取相应的细胞扩培及处理费用大约需要1*10^6/样)
收费标准:
菩禾生物所有服务项目:
细胞平台 | 行为学检测 | 动物模型 |
原代细胞制备与培养 | 水迷宫检测 | 慢性胰腺炎模型 |
细胞培养、传代 | 十字架 | 肝纤维化模型 |
原代细胞传代培养 | 非酒精性脂肪肝 | |
细胞系STR鉴定服务 | 动物模型 | 骨质疏松模型 |
细胞转染 | 小/大鼠饲养 | 糖尿病模型 |
MTT细胞增殖、活性、毒性检测 | 小/大鼠灌胃 | 眼外伤模型 |
CCK8细胞增殖、活性、毒性检测 | 兔子饲养费 | 青光眼模型 |
流式细胞凋亡检测 | 大鼠灌胃 | 烧烫伤模型 |
流式细胞周期检测 | 小鼠灌胃 | 短肠模型 |
血管形成实验(非钙染/钙染) | 兔子灌胃 | 肾衰模型 |
ROS检测 | 腹腔/肌肉给药(大小鼠) | 肾炎模型 |
划痕实验 | 腹腔/肌肉给药(兔子) | 尿路结石 |
克隆形成实验 | 尿液/粪便采集 | 高氧/低氧损伤模型 |
粘附实验 | 血液采集 | |
transwell实验(迁移) | TTC染色 | 病理平台 |
transwell实验(侵袭) | 超声检测 | 组织包埋 |
贴壁/悬浮细胞转细胞株构建 | 血常规检测 | 冰冻/石蜡切片 |
耐药细胞株筛选构建 | DR检测 | HE染色 |
骨组织切片 | 其他特殊染色 | |
分子平台 | microCT | 全扫描拍照 |
载体构建 | 皮下瘤模型 | 扫描电镜 |
细胞/组织/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射电镜 |
mRNA/miRNA等引物设计 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
RT-qPCR检测 | 心肌缺血再灌注模型 | |
CHIP检测 | 门静脉高压动物模型 | |
EMSA检测 | 高血压动物模型 | |
双荧光素酶实验 | 心肌梗死动物模型 | |
原位杂交 | 动脉粥样硬化动物模型 | |
脑缺血再灌注 | ||
免疫平台 | 肾性高血压模型 | |
蛋白(核/膜/总)提取 | 主动脉弓狭窄模型 | |
蛋白含量测定 | 脊髓损伤模型 | |
Western Blot检测 | 背根神经节损伤模型 | |
COIP | 脑瘫模型 | |
免疫组化/荧光 | 癫痫模型 | |
抑郁症模型 | ||
行为学检测 | 肾脏缺血再灌注模型 | |
水迷宫检测 | 关节炎 | |
十字架 | 肺气肿模型 |
六、实验服务流程
无锡菩禾生物是一家专业提供生物医药技术服务和细胞整体解决方案的高科技企业。拥有CMA 质量体系认证的实验室,5大技术平台(细胞平台、分子平台、免疫平台、病理平台、动物平台),以专业、严谨、求真、高效服务理念,为全国科研工作者提供一站式技术检测服务。
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