产品详情
文献和实验
相关推荐
保质期 :咨询客服
英文名 :DM BIOLOGY
库存 :325470
供应商 :DM
产品用途 :科研
规格 :96T/48T
兔抗AFP血清
阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出
1.未达要求的孵育温度及孵育时间 可检出强阳性标本,但 质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出
2.质控品或标本高温放置过久,或被反复冻融致待测物滴度下降,而未能检出
3.仪器设定不正确,滤光片不匹配
对策
1.确认孵育的温度及孵育时间达到要求
2.质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的,可存于 2-8℃,如需长期保存,应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装,并置于-20℃以下保存
3.重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配
终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低
1.酶标仪参数设定不正确
对策
1.重新设定酶标仪的参数,特别是检查滤光片是否匹配
目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低?
灵敏度过高、板底高、高背
景
兔抗AFP血清
终止后,整板结果显现均一的黄色或淡黄色;或阴阳性对照、质控正常,标本阴性标本 OD值过高
1.整板的黄板现象可能是由于错加其他试剂造成,如同时操作两对半 试剂时,测 HbsAb板用于测HBsAg等
2.酶标对吸头的污染以及对盛放显色剂容器的污染都易造成黄板现象
3.显色剂在光照条件下放置过久,实验前已变蓝
4.孵育温度过高或孵育时间过长
5.未按要求洗板。特别是洗涤时每孔未注满洗液,易造成花板黄板现象
6.花板,一般是由于临床标本的收集、处理和保存方法不当造成
对策
1.实验前检查试剂的组分及批号,确认所有组分均属于对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.避免试剂组分间的交叉污染,确保吸头、容器的干净
3.显色剂 A、B未使用前避光保存
4.孵育温度应控制在 37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作。
5.严格按说明书要求洗板
6.放置时间(自然放置 1~2h)及离心转速(3000r/min)、离心时间(15min)应引起注意
出现随机 性的花板、跳孔现象
1.样品离心不完全,反应孔内发生凝血或残留细胞成分
2.加样时交叉污染
3.手工洗板造成的交叉污染
4.洗板机加液头堵塞导致加液不满或吸液残留量较大,造成 花板、跳孔
5.拍板时交叉污染
对策
1.充分离心, 3000rpm6分钟以上
2.加标本时尽量 避免交叉污染。如盛标本的试管周围常有血痂,易脱落,应远离酶标板
3.手工洗板时前 3次注洗液后应立即弃去,后几次再设定浸泡时间,可减少交叉污染
4.疏通加液头,使洗板时每孔均注满洗液,吸液时残留量要小
5.洗板完毕拍板时用合适的吸水纸巾,不要把无关物质拍进板孔,并尽量不要在同位置拍,以免交叉污染
假阳性
假阳性现象是一个现象,可参考上文 “灵敏度过高、板底高、高背景” 中的分析。这里只列举常见的原因及对策
1.计算 Cutoff值时使用的公式不正确,导致计算得出的CutOff值过低,从而导致出现假阳性
2.洗板时未能注满洗液或洗板次数、浸泡时间不够, 洗涤不充分,样 品中有其他成分残留 导致花板、跳孔,假阳性增多
3.血清标本处理不当,如未除去细胞成分、纤维蛋白原及其它干扰物可出现孔底由变蓝的跳孔现象,此标本重复实验结果往往是阴性
4.厂家试剂质量的变化造成
5.水质问题
6.加酶量过多(如 50uL误认为100uL)或丙肝酶稀释时加量过多
7.培养箱温度超过 37℃或酶结合物反应时间或底物显色时间超过
8.底物配制时间过长、或底物污染
9.该批样品放置时间过长,样品污染
10.移液嘴重复使用,未洗净或消毒不完全而用于加酶或底物
兔抗AFP血清
对策
1.CutOff值计算公式应严格参照所属产品的说明书,应注意各个酶免产品的Cutoff值计算公式不尽相同
2.严格按说明书要求洗板。调整洗板机时,应注意有时仪器标示的液量与实际液量并不相符,应根据实际情况调整至每孔注满
3.放置时间(自然放置 1~2h)及离心转速(3000r/min)、离心时间(15min)应引起注意
4.国家标准要求提高灵敏度时,厂家试剂灵敏度也相应提高,假阳率常常有所上升,但只要在合理范围,是可以接受的
5.防止蒸馏水污染
6.加酶前检查移液器调节量是否准确,稀释酶时思想要集中。
7.放入板以前要检查培养箱的温度,准确定时
8.底物应在酶反应完毕即将洗涤前 5分钟配制,注意避光
9.样品应保持新鲜,或低温保存,防止污染
10.移液嘴尽可能一次性使用
重复性差
1.样品数量不一,加样时间长短不一
2.样品加入后未混匀
3.酶标仪滤光片不对或输入波长不对
4.酶标仪测定重复性差
5.洗涤不正确
6.温育条件不一致(一次用水育,一次用恒温箱)
7.慎多加或少加酶或显色剂
8.阈值附近时阴时阳
9.加样量不足、保温时间、洗涤条件一致
对策
1.重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近
2.加样后在混匀器上充分混匀
3.TMB显色用450/630波长
4.校对酶标仪
5.洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下,垂直用力甩净内容物(可多甩几次),在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔,洗涤应充分
6.恒温箱温育较水浴显色深,?OD值高出0.1-0.15,最好均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃
7.多加时显色深,少加则浅,用记号笔圈上,便于分析
8.同一样品做三个复孔,以二个(含二个以上相同结果为准)
9.尽可能使用同一移液器和装紧吸嘴重复测定标本。条件、人员等应尽量与上次保持一致
兔抗AFP血清
相关产品:
鸡免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIb(FcγR3B)酶联免疫试剂盒 | Chicken FcγR3B (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit |
鸡趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联免疫试剂盒 | Chicken CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit |
鸡血红蛋白H(HbH)酶联免疫试剂盒 | Chicken HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit |
鸡去唾液酸糖蛋白受体2(ASGR2)酶联免疫试剂盒 | Chicken ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit |
鸡鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)酶联免疫试剂盒 | Chicken GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit |
鸡血小板反应蛋白4(TSP-4)酶联免疫试剂盒 | Chicken TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit |
鸡半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)酶联免疫试剂盒 | Chicken CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit |
鸡游离血红蛋白(f-Hb)酶联免疫试剂盒 | Chicken f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit |
鸡原钙黏素β16(PCDHβ16)酶联免疫试剂盒 | Chicken PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit |
鸡肌球蛋白轻链激酶(MLCK/MYLK)酶联免疫试剂盒 | Chicken MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit |
鸡IV D组磷脂酶A2(PLA2G4D)酶联免疫试剂盒 | Chicken PLA2G4D (Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit |
鸡细胞周期素D2(CCND2)酶联免疫试剂盒 | Chicken CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit |
鸡异常凝血酶原(APT)酶联免疫试剂盒 | Chicken APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit |
鸡血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)酶联免疫试剂盒 | Chicken PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit |
鸡G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)酶联免疫试剂盒 | Chicken GPER1 (G Protein Coupled Estrogen Receptor 1) ELISA Kit |
鸡血小板衍生生长因子D(FDGFD)酶联免疫试剂盒 | Chicken PDGFD (Platelet Derived Growth Factor D) ELISA Kit |
鸡脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫试剂盒 | Chicken ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit |
上海笃玛生物科技有限公司
实名认证
金牌会员
入驻年限:10年