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文献和实验
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保存条件 :2-8℃
保质期 :6个月
英文名 :DM Biology
库存 :214000
供应商 :DM
CAS号 :大量现货
规格 :96T/48T
雌三醇(E3)试剂价格
样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
样品采集:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒提供免费检测服务,7个工作日内出实验报告,保质保量完成委托实验,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。
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不同研究领域对应的指标:
研究方向 检测指标
细胞治疗 IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-6、IL-10、IL-15、IL-21、Granzyme B 、GM-CSF、BCMA、IDO、HGF……
感染/肝病 IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、GM-CSF、CRP、IFN-β、IL-10、IL-18、MCP-1、FGF-19……
风湿免疫/自免 IL-4、IL-5、IL-6、IL-12p70、IL-13、IL-17、IL-18、IL-21、IL-23、CXCL1、MMP-9、TNF-α、GM-CSF、G-CSF……
肿瘤 PD-1、PD-L1、VEGF、VEGFR2、BCMA、TGF-b、FGF-19、PDGF-BB、HGF、CD25、CD28……
心血管 ST2、PCSK9、ACE2、HGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-BB、ANGPTL3、GH、CRP……
内分泌/糖尿病 Insulin、Glucagon、Leptin、C-peptide、HGF、ACE2、VEGF、CRP……
神经科 BDNF、b-NGF、Neuropilin-1、ACE2、TGF-β1、VEGF、IL-8、MMP-9、Leptin……
雌三醇(E3)试剂价格
原理】
ELISA双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体,与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量。
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
雌三醇(E3)试剂价格
操作常见问题解析:
1.加样?
在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
2.边缘效应
使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
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计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
酶联免疫吸附剂测定可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
48μmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
24μmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
12μmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
6μmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
3μmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
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