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文献和实验
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服务名称 :免疫组化
提供商 :无锡菩禾生物医药技术有限公司
规格 :普通免疫组化不含一抗
免疫组化
免疫学基本原理.通过标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分别进行组织和细胞原位检测,从而进行定位、定性及相对定量的研究。
实验意义
1.免疫组织化学可应用于恶性肿瘤的病理诊断和科研工作。2.可与组织化学染色方法的形态学诊断相结合, 提高疑难肿瘤的鉴别诊断的准确率.并为肿瘤进行进一步的病理分型。3.指导和提供临床治疗方案的选择。
实验步骤
1.石蜡切片免疫组化:①67°C烘箱烘片2小时,常规脱蜡至水.用pH 7.4的PBS冲洗三次。每次3 min ;②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min ,蒸馏水冲洗三次。PBS冲洗三次,每次3 min;③3%H202室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性, PBS冲洗三次,每次3 min ;④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭.室温孵育10 min ,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗。37*C孵育1-2 h或者4°C孵育过夜;⑤PBS冲洗三次,每次3 min ;滴加稀释至适当比例的带标记:二抗.379C孵育10~30 min , PBS冲洗三次,每次3 min ;⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液. 379C孵育10-30 min, PBS冲洗三次。每次3 min;⑦显色剂显色.自来水充分冲洗,复染细胞核,酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。2冰冻切片免疫组化:
①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片.厚度为5~6 μm ;
②载玻片可不打底,裱片后立刻用电吹风吹干;
③染色前需用冷*酮4°C固定10-20 min :
④PBS洗2次,每次5 min ; .
⑤3%H202灭活内源性过氧化物酶20 min ,需遍光处理;
⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似,最后脱水透明封片进行观察。
结果展示:
实验完成周期及交付标准:
1.实验周期; 1-2周
2.交付标准:
1、原始定性、定位结果图片;
2、详细实验报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
3、每个样品可提供(3张,200X光镜照片),具体照片倍数可根据客户要求而定
需确认的信息:
1.样本的种属?
2.样本类型
3.检测的目的蛋白
4.是否提供一抗(一抗如果公司抗体库里有该指标抗体,则可共享)
5.阳性率或者半定量分析要求
6.拍照要求
细胞平台 | 行为学检测 | 动物模型 |
原代细胞制备与培养 | 水迷宫检测 | 慢性胰腺炎模型 |
细胞培养、传代 | 十字架 | 肝纤维化模型 |
原代细胞传代培养 | 非酒精性脂肪肝 | |
细胞系STR鉴定服务 | 动物模型 | 骨质疏松模型 |
细胞转染 | 小/大鼠饲养 | 糖尿病模型 |
MTT细胞增殖、活性、毒性检测 | 小/大鼠灌胃 | 眼外伤模型 |
CCK8细胞增殖、活性、毒性检测 | 兔子饲养费 | 青光眼模型 |
流式细胞凋亡检测 | 大鼠灌胃 | 烧烫伤模型 |
流式细胞周期检测 | 小鼠灌胃 | 短肠模型 |
血管形成实验(非钙染/钙染) | 兔子灌胃 | 肾衰模型 |
ROS检测 | 腹腔/肌肉给药(大小鼠) | 肾炎模型 |
划痕实验 | 腹腔/肌肉给药(兔子) | 尿路结石 |
克隆形成实验 | 尿液/粪便采集 | 高氧/低氧损伤模型 |
粘附实验 | 血液采集 | |
transwell实验(迁移) | TTC染色 | 病理平台 |
transwell实验(侵袭) | 超声检测 | 组织包埋 |
贴壁/悬浮细胞转细胞株构建 | 血常规检测 | 冰冻/石蜡切片 |
耐药细胞株筛选构建 | DR检测 | HE染色 |
骨组织切片 | 其他特殊染色 | |
分子平台 | microCT | 全扫描拍照 |
载体构建 | 皮下瘤模型 | 扫描电镜 |
细胞/组织/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射电镜 |
mRNA/miRNA等引物设计 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
RT-qPCR检测 | 心肌缺血再灌注模型 | |
CHIP检测 | 门静脉高压动物模型 | |
EMSA检测 | 高血压动物模型 | |
双荧光素酶实验 | 心肌梗死动物模型 | |
原位杂交 | 动脉粥样硬化动物模型 | |
脑缺血再灌注 | ||
免疫平台 | 肾性高血压模型 | |
蛋白(核/膜/总)提取 | 主动脉弓狭窄模型 | |
蛋白含量测定 | 脊髓损伤模型 | |
Western Blot检测 | 背根神经节损伤模型 | |
COIP | 脑瘫模型 | |
免疫组化/荧光 | 癫痫模型 | |
抑郁症模型 | ||
行为学检测 | 肾脏缺血再灌注模型 | |
水迷宫检测 | 关节炎 | |
十字架 | 肺气肿模型 |
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