DH5α 感受态细胞

保存条件 ：-70度保存

保质期 ：一年

英文名 ：NcmDH5α Competent Cell

库存 ：大于10000

供应商 ：新赛美生物科技有限公司

规格 ：10支

NcmDH5α Competent Cell是新赛美生物研发的用特殊化学方制备的DH5α感受态细胞，相比于常规方法制备的感受态细胞，其转化不需要冰浴、热激和孵育等步骤，最快能在30秒内完成转化步骤。转化步骤多样性，可以实现30秒，5分钟及传统步骤的转化，效率可达10⁸-10⁹菌落数/ug质粒（pUC19），是实现DNA克隆，文库构建等实验的理想产品。

产品特性：

• 转化快：最快30秒快速转化，不需冰浴、热激和孵育步骤
• 效率高：可达到10⁸-10⁹cfu/ug pUC19 DNA
• 稳定性好：-70度冰箱可保存一年时间

NcmDH5a基因型：
F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169deoRrecA1endA1hsdR17(rk-,mk+)phoAsupE44λ-thi-1gyrA96relA1

转化示意图：

转化步骤：
（1）30秒快速转化：
1. 取100ul冰浴上融化的NcmDH5α感受态细胞，加入目的DNA（质粒或者连接产物），轻轻混匀。
2.向每个离心管中加入200ul无菌的SOC或者LB培养基（不含抗生素），轻柔地混匀。
3. 吸取已转化的感受态细胞加到含氨苄抗生素的LB琼脂培养基上，将细胞均匀涂开。将平板置于37℃至液体被稀释，平板倒置，过夜培养。
注意：30秒快速转化的产物是携带氨苄抗性的质粒；其他抗性的质粒，开始步骤一致，但加入SOC或LB培养基后，需在37℃，200 rmp 的摇床上至少孵育30分钟，然后再涂板。

（2）5分钟转化：
1. 取100ul冰浴上融化的NcmDH5α感受态细胞，加入目的DNA（质粒或者连接产物），轻轻混匀，在冰浴中静置2分钟。
2. 42℃水浴中热激30秒，然后快速将离心管转移至冰浴中2分钟，该过程不要振荡离心管。
3. 向每个离心管中加入200ul无菌的SOC或者LB培养基（不含抗生素），轻柔地混匀。
4. 吸取已转化的感受态细胞加到含氨苄抗生素的LB琼脂培养基上，将细胞均匀涂开。将平板置于37℃至液体被稀释，平板倒置，过夜培养。
注意：5分钟快速转化的产物是携带氨苄抗性的质粒；其他抗性的质粒，开始步骤一致，但加入SOC或LB培养基后，需在37℃，200 rmp 的摇床上至少孵育30分钟，然后再涂板。

（3）传统转化步骤
1. 取100ul冰浴上融化的NcmDH5α感受态细胞，加入目的DNA（质粒或者连接产物），轻轻混匀，在冰浴中静置30分钟。
2. 42℃水浴中热激30秒，然后快速将离心管转移至冰浴中2分钟，该过程不要振荡离心管。
3. 向每个离心管中加入900ul无菌的SOC或者LB培养基（不含抗生素），轻柔地混匀后置于37℃，200rpm摇床上孵育1小时，使细菌复苏。
4. 根据实验要求，吸取不同体积或者离心浓缩后的已转化的感受态细胞加入含相应抗生素的LB琼脂培养基上，将细胞均匀涂开，将平板置于37℃至液体被稀释，平板倒置，过夜培养。


扫描二维码，即可享免费申请试用：

官方网站：www.ncmbio.com, 邮箱：xinsaimei@ncmbio.com,联系电话：0512-66378926
苏州地区：吴中区东吴北路19号中元商务大厦1502，杨经理：18021302169
上海地区：上海市闵行区航东路291号604，刘经理：18818239490

因业务快速发展需要，现诚招各地代理商，与我们共创美好明天。