iTRAQ定量蛋白质组学

iTRAQ技术是由美国应用生物系统公司(Applied Biosystems Incorporation，ABI)2004年开发的同重标签标记的相对和绝对定量(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation，iTRAQ)技术。双向电泳通常对极酸和极碱/极大和极小蛋白质以及膜蛋白的分离效果有限,iTRAQ技术在这些方面与双向电泳有很好的互补性。该技术采用四个具有相同质量的同位素标签对四种状态的生物学标本进行标记，联合液相质谱仪可对包括转录因子和各种激酶在内的许多低丰度蛋白进行定量，是用于发现疾病早期诊断生物标志物的最佳手段。
iTRAQ试剂是可与氨基（包括氨基酸N端及赖氨酸侧链氨基）连接的胺标记同重元素。在一级质谱图中，任何一种iTRAQ试剂标记不同样本中的同一蛋白质表现为相同的质荷比。
在一级质谱中，不同来源的相同肽段表现为一个峰；
在二级质谱中，iTRAQ试剂中的平衡基团发生中性丢失，信号离子表现为不同质荷比(114～121)的峰，因此根据波峰的高度及面积，可以得到同一蛋白在不同样本中的表达差异；同时，肽段的MS/MS结果结合数据库检索可以鉴定出相应的蛋白种类（图1）。 iTRAQ试剂标记原理iTRAQ试剂包括3部分：报告部分,肽反应部分,平衡部位(图2). 报告部分共有8种：质量数分别为114~121Da，因此iTRAQ最多可同时标记8组样品（客户可按需选择标记个数）。
肽反应部分：能与肽链N端及赖氨酸侧链发生共价连接，从而将报告部分和平衡部位标记到肽段上，几乎可以标记所有蛋白质。
平衡部分：质量数分别为31~24Da，与报告部分相互配合，保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比。

iTRAQ技术优势
灵敏度高：可检测出低丰度蛋白；
分离能力强:可分离出酸/碱性蛋白，小于10KD或大于200KD的蛋白、难溶性蛋白等；
适用范围广：可以对任何类型的蛋白质进行鉴定，包括膜蛋白、核蛋白和胞外蛋白等。
高通量：可同时对8个样本进行分析，特别适用于采用多种处理方式或来自多个处理时间的样本的差异蛋白分析；
结果可靠：定性与定量同步进行，同时给出每一个组分的相对表达水平、分子量和丰富的结构信息；
自动化程度高：液质连用，自动化操作，分析速度快，分离效果好

送样要求
iTRAQ试剂可以标记任何类型的样本，如组织、细胞、细菌等材料。因此本公司接受任何类型的样本，对于不同的样本需要的量有所不同，具体需要量请咨询本公司。
运输要求：液氮或干冰保存寄送，广州本地客户可上门收样。注：样本应避免各类污染和反复冻融。

ITRAQ技术服务结果提交
蛋白定鉴定和定量分析结果；
顾客指定蛋白质对应的质谱峰图；
实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。（附实验报告）

服务周期与收费标准
详情请咨询本公司