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保存条件 :-20 ℃
规格 :4 μg
pGK2.1(Puro)
❀ 产品描述
pGK2.1 是一种高效、精准的基因编辑载体,它是基于人工核酸内切酶 CRISPR/Cas9 而研发的,相对于传统敲除技术和 TALENs、ZFNs 技术而言,其操作更加简便,敲除效率最高,基因的编辑更加的精准, 大大降低了脱靶机率。该载体能够适用于几乎所有哺乳动物细胞的基因修饰研究。
pGK2.1 载体包含 Cas9 核酸酶表达框和 Guide RNA (gRNA) 克隆框,gRNA 克隆框能够快速高效的克隆编 码靶标特异的CRISPR RNA (crRNA)的 DNA 片段。该载体含有两个敲除插入位点,可以实现基因片段的敲除,另外,它还含有 Puror 的筛选标记,让您仅靠单个载体就可以轻松地完成基因组 DNA 的编辑,实现精准、低 off-target 的基因编辑体验。
※注:pGK2.1 在原核中是呈现卡那霉素抗性的,卡那霉素抗性基因编码的是新霉素磷酸转移酶II,基因记做 Neo ,能通过降解G418、新霉素和卡那霉素来实现真核和原核细胞的相应抗性,所以其既可以在原核生物中表达使大肠杆菌等表现出卡那霉素抗性,也可以再真核生物中表达使动植物细胞表现出 G418 抗性。
❀ 产品优势
● 精准的修饰:Cas9 蛋白无特异性,降低脱靶效应,实现精准的基因编辑;
● 敲除效率高:较传统技术和 TALENs、ZFNs 技术,敲除效率最高;CRISPR/Cas9 系统的两大功能组件于一 个载体上,转染效率更高;
● 双敲除:具有两个启动 gRNA 的启动子,两个敲除插入位点,可以实现基因片段的敲除;
● 操作简便:编码 sgRNA 的 DNA 片段小于 100 bp,这些使操作更加简便。
❀ 保存
-20 ℃
❀ 注意事项
因为 Cas9 蛋白比较大,就导致整个敲除质粒较大(10 kb左右),如此大的质粒很容易导致转化效率低下, 尤其是使用脂质体等化学试剂转染时,转染效率会比较低些。所以,我们推荐使用电转的方法进行转染。 Genloci 的 Celetrix 细胞电转仪(型号 CTX-1500A;Cat. No. GP7901,GP7902),转化效率高,可适用于难转染的细胞系。
Cat. No. | 产品名称 | 规格 |
GP0128 | pGK2.1 (Puro) | 4 μg |
江苏吉锐生物技术有限公司
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入驻年限:9年