HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱5ml(DEAE琼脂糖凝胶)

保存条件 ：4℃保存

保质期 ：有效期2年

英文名 ：HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML

库存 ：大量

供应商 ：翌圣生物科技(上海)股份有限公司

CAS号 ：无

规格 ：5ml(CAT#20542ES08)

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱，5ML	20542ES08	5ml	4℃	528.00

产品描述
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质，可耐受较高的流速及更高的化学稳定性，适合实验室及工业大规模纯化，离子交换基团-O-CH₂CH₂-N (C₂H₅)₂。
本品HiSep DEAE弱阴离子纯化预装柱是一种以DEAE弱阴离子交换树脂为填料的中压预装柱，规格为5ml，该预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作。

产品性质

基质（Matrix）	高度交联的6%琼脂糖微球
粒径（Bead size）	45-165µm
离子交换类型（Type）	弱阴离子
载量（Capacity）	～0.11-0.16mmol Cl-/ml 基质
流速（Flow Rate）	300-600cm/h
pH范围（pH Range）	2-12
储存缓冲液（Buffer）	20%乙醇
柱子尺寸（Column Size）	1.65×2.7cm（5ml）

运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存，有效期2年。

使用方法
1 缓冲液的准备
所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤。
2 样品准备
样品在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3 样品纯化
1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口， 将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。
2）用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。
3）使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱，推荐流速为5ml/min。
4）利用泵或注射器上样。
【注】：样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。
5）用洗杂Buffer冲洗柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线（一般至少10-15个柱体积）。
6）用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度，例如 20 倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。
4 SDS-PAGE 检测
将得到的样品（包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。
5 填料清洗
离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。
CIP（Cleaning In Place）清洗
离子交换树脂可以重复使用而无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
1）去除一些沉淀或变性物质
用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
3）去除一些离子键结合物质
用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2）Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表 问题及解决方案

问题	可能原因	推荐解决方案
柱子反压过高	填料被堵塞	按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。
		样品中含有微小的固体颗粒，建议使用前用0.22µm或0.45µm滤膜过滤。
洗脱样品较杂	树脂重复多次使用	按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。
	平衡不充分	增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂。

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