TUNEL法 In Situ Cell Death Detection Kit, POD

Application

In Situ Cell Death Detection Kit, POD 可准确、快速、简便的在细胞和组织内对细胞凋亡进行非放射性的、单细胞水平检测和定量。因此，In Situ Cell Death Detection Kit 可以用于多种检测体系。
例如：

• 在基础研究和常规病理学检测中用于检测冷冻和甲醛固定的组织切片内的单个凋亡细胞。
• 在癌症研究和临床肿瘤学中用于检测恶性细胞对药物诱导的凋亡的敏感性。
• 使用双染色步骤对异质性群体内正在死亡的细胞进行分型。

  Features and Benefits

  灵敏：对凋亡细胞的标记（细胞染色）的最大强度高于切口平移法。
  快速：使用荧光素dUTP，可以在TUNEL反应后直接分析样品，但必须在加入次级检测系统之前。
  方便：使用荧光素dUTP直接标记，可以在检测过程中验证TUNEL反应的效率。
  精确：在分子水平（DNA链断裂）检测细胞凋亡，检测处于凋亡早期的细胞。
  灵活：无需底物；可以选择多种染色方法。

  该试剂盒用于在免疫组化中使用光学显微镜检测并定量单细胞水平的细胞凋亡。

  Other Notes

  仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

  包装

  1个试剂盒包含3种组分。

  Principle

  In Situ Cell Death Detection Kit, POD是基于对细胞凋亡早期阶段的DNA单链和双链断裂进行检测。
  对凋亡细胞进行固定和通透性处理。然后，将细胞置于包含有TdT和荧光素dUTP的TUNEL反应混合液中进行孵育。在此孵育过程中，TdT催化将荧光素dUTP连接到单链或双链DNA的游离3′-OH基团上。进行洗脱步骤之后，用带有过氧化物酶标记的抗荧光素抗体对DNA损伤位点结合的dUTP进行标记。洗脱去除未结合的酶偶联体之后，对免疫复合物留存的POD进行底物显色。

  Preparation Note

  储存条件（工作液）：TUNEL反应混合液
  TUNEL反应混合液应当在使用前制备，不宜保存。在使用之前应一直置于冰上。
  
  Converter-peroxidase
  Converter-peroxidase融化后应保存于2~8 °C 下（最长保存6个月）。
  备注： 注意：不要冻存。
  
  样本材料：Cytospin和细胞涂片的准备，玻片上生长的贴壁细胞，以及冰冻和石蜡包埋的组织切片。