蛋白质组学

服务名称 ：iTRAQ

提供商 ：美吉生物

美吉生物拥有一流的液质联用平台、实力雄厚的技术团队和国际一流的生物信息分析团队、可以给您提供专业。合理和高性价比的技术方案和服务。 同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）技术由AB SCIEX于2004年开发并推出，是目前差异蛋白质定量分析方法通量最高，系统误差最小，功能最强大的分析方法之一。 可以同时比较2-8组样品的蛋白质表达差异。目前iTRAQ做到8个样品（8plex）同时标记分析，TMT同时做到10个样品(10plex) .



应用领域

• 机理和调控机制研究 动态过程中机制研究
• 疾病标志物的筛选，用药及预后标志物筛选

实验流程



分析流程




送样指导

样品类型	样品要求（/组样品）	备注
蛋白质溶液	蛋白质总量≥300µg	重复实验则量翻倍，建议准备两份样品备用。
组织样品	样品总量≥0.1g	按照蛋白质组织提取效率（蛋白：组织=7%）
细胞样品	细胞数量≥107个	胰酶消化，按细胞冻存标准离心收集细胞即可。
体液样品	血清≥200µL，脑脊液≥200µL，尿液≥1mL ，泪液≥1mL.

经典案例

精神错乱患者的患者的脑脊液中的蛋白质表达含量变化

利用iTRAQ蛋白质组学相对定量方法，探讨精神错乱的发病机制。通过iTRAQ方法分析17类精神错乱患者的脑脊液中的蛋白质表达含量变化，一共鉴定并定量到了270个脑脊液中蛋白质：16个在大多数精神错乱患者中异常表达；一部分蛋白质与认知程度和精神错乱严重程度相关；这些结果为后期精神错乱的机制研究及诊断提供了参考。

参考文献：

Poljak, A., et al. (2014) Quantitative proteomics of delirium cerebrospinal fluid. Translational psychiatry 4, e477.

常见问题

1、iTRAQ定量蛋白质组实验完成后，能拿到什么结果，是否可以直接用来发文章？

我们目前的iTRAQ定量蛋白质组的实验流程和结果都是受到业内顶级杂志JPR和MCP认可的，可以直接用于文章的发表。客户不仅可以拿到iTRAQ定量蛋白质组中的差异蛋白、蛋白的GO和KEGG归类信息、COG归类、不同样本的差异蛋白的聚类分析、差异蛋白的互作蛋白信息等，还可以提供客户指定的分析内容，提供个性化的服务要求，比如转录组和蛋白质组的关联分析。

该技术的缺陷：应该说这是唯一的缺陷，就是定量不是当前定量技术最准确的，最准确的是SWATH和MRM技术。定量不准确的原因是附近m/z同位素的干扰，这些m/z接近的同位素引入了干扰的4标记或8标记的同位素，最终导致原本差异10倍，而干扰会将10倍变成5倍左右。当然，差异蛋白的趋势是正确的，大量发表的研究论文也证实了这一点。