人前列腺特异性抗原（PSA）ELISA试剂盒

库存 ：226

供应商 ：齐一生物科技（上海）有限公司

检测限 ：详细请见说明书

检测方法 ：ELISA酶联免疫法

应用 ：科研检测

标记物 ：见详细

样本 ：血清，血浆，尿液，胸腹水，脑脊液，细胞培养上清，组织匀浆等

规格 ：48T/96T

人前列腺特异性抗原（PSA）ELISA试剂盒规格：96T/48T
库存：现货
保存条件：2-8℃
人前列腺特异性抗原（PSA）ELISA试剂盒使用范围：仅供科研检测,不得用于临床.
试剂盒发货方式：专门快递免费送货上门
产品价格：价格优惠,欢迎来电洽谈！
试剂盒使用说明书:说明书随货发送,您也可以直接联系我公司在线销售人员索取.全国热线：400-991-0197代理多种品牌进口原装、“ELISA试剂盒”.齐一生物科技有限公司作为酶联免疫供应商,凭借精湛的技术,全方位的售前售后免费代测提供技术服务,共同铸就高品质的产品.多年专业酶免服务,质量保证,可免费提供代测服务,一周内出结果.欢迎来电咨询订购！
移液注意事项
反复而准确移液的关键是连贯的操作。流畅而迅速的移液操作是非常重要的。吸液和释放液
体是都要避免剧烈的移动。
检查枪头大小是否合适，是否固定完好。
在滴加样品或试剂时，每次更换枪头。
请勿转移小于移液器生产厂家推荐的最小体积的液体。否则将会降低实验的准确性和重复
性。
某些液体易于附着在枪头的内外表面上，所以，预先洗涤枪头以避免由于这种表面张力
而引起的液体体积变化。这样会增加移液的准确性。
若果需要移动的液体是粘稠的，在吸取液体时，请在待取液体中停留一段时间，待体积达到
平衡后再移出。
用移液器吸取液体之后，用不含棉的绒纸片擦干枪头的外表面。
在吸取液体时枪头内如果出现气泡，排出已吸液体并重新从容器中缓慢吸取一次。如果枪头
内依然出现气泡，则更换枪头。
在吸取液体时枪头内如果出现泡沫，则轻微倾斜移液器，并缓慢吸取液体。
每种试剂均分开配制贮存

样本信息（Sample Information ）
我能否在实验开始前一天收集样品？
除非试剂盒内说明书特别说明不允许，一般都可以。如果收集的样品不能够及时进行检测，
请保存至-20℃或者按照说明书进行保存。应避免反复冻融。
-20℃是推荐的冷藏保存温度。解冻的平衡过程可能会导致样品的降解。

我是否必需按照试剂盒内说明书中的方法准备样品？
推荐的样品准备方法是经过实验验证的好方法，所以推荐按照说明书上的方法制备样
品。

我能否不用推荐的收集方法来收集血浆？
每一次按照推荐步骤操作的测定都是经过验证可行的。在某些测定中有些抗凝剂是不被推荐
的。具体请参看说明书。
有些待检测的分析物也存在于血小板中，因此，推荐使用低血小板血浆。正确的收集操作方
法请参看说明书。

我能否使用自己的稀释液或者缓冲液？
每个试剂盒中都含有按配方配制的与特异性样品种属相配套的稀释液，以确保待检测的样品
被正确稀释。具体请参看说明书。


人前列腺特异性抗原（PSA）ELISA试剂盒建议
确定待检测的样品在收集和制备时保证无菌操作。
如果要检测多个样品，将样品隔离并标记清楚以防相互污染。
检测前，将样品离心除去颗粒。将样品转移至新的离心管内，混合均匀。
在混合样品时，使用容积至少比样品体积大50%的离心管以保证混合充分。

酶联免疫吸附实验材料,试剂,溶液
1．酶标板,100μltip头,1mlEp管,湿盒
2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH9.6）
碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH9.6
3.封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗涤液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH7.4
5.样本稀释液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH7.4
6.酶标第2抗体(羊抗兔)稀释范围1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-过氧化氢尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,无水乙醇10ml,加双蒸水至100ml.
②底物液B(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,柠檬酸0.933g,0.75%过氧化氢尿素0.64ml,加三蒸水至100ml,调至pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-过氧化氢尿素溶液.
8.终止液(2mol/LH2SO4溶液)双蒸水200ml,浓硫酸34ml,(缓慢滴加并不断搅拌),加双蒸水至300ml9.0.9%生理盐水
操作步骤:
1.包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):
将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)
2.封闭酶标反应孔:
5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干
洗涤次数3次
3.加入待检测样品(建立合适的浓度梯度):
检测时一般采用1:50-1:400的稀释度,应采用较大稀释体积进行,一般保证样品吸取量>20μl.
将稀释好的样品加入酶标反应孔中,每样品至少加双孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
4.加入酶标抗体:
酶标抗体:根据酶结合物提供商提供的参考工作稀释度进行.37℃,30-60min之间.短于30min往往结果不稳定.每孔加100μl.洗涤同前.
5.加入底物液(现用现配):
TMB-过氧化氢尿素溶液,OPD-过氧化氢底物液系统次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分钟,加入终止液显色.
6.终止反应:
每孔加入终止液50μl终止反应,于20min内测定实验结果.
7.结果判断:
OPD显色后采用492nm波长,TMB反应产物检测需要450nm波长.检测时一定要首先进行空白孔系统调零.用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表示,当P/N大于2时作为抗体的效价.(数值的大小依具体检测要求而定.)