研选碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒（微量酶标法）-48T

保存条件 ：4℃避光

保质期 ：6个月

规格 ：48T

万类生物试剂促销：试剂盒8折优惠，碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒（微量酶标法）-48T 原价180元，现价144元。

产品名称：碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒（微量酶标法）（试用装10T）

产品概述：
包装信息：


保存日期：本试剂盒自订购之日起6月内有效。

该产品被引用文献（仅展示部分）：
1、Zhao J; Liu Z; Chang Z, Osteogenic differentiation and calcification of human aortic smooth muscle cells is induced by the RCN2/STAT3/miR-155-5p feedback loop. Vascul Pharmacol 2020, 106821.
PubMed: 33221530
2、Chang Z; Yan G; Zheng J, et al., The lncRNA GAS5 Inhibits the Osteogenic Differentiation and Calcification of Human Vascular Smooth Muscle Cells. Calcif Tissue Int 2020, 107 (1), 86-95.
PubMed: 32347320

操作流程:
一、样本前处理：
1. 血清（浆）：可直接取样用于测定（个别含量过高的样本需要稀释后测定，如鸡血清（浆）中ALP活力 较高，一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测）。
2. 组织：准确称取待测组织的重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水进行匀浆，2500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
3. 细胞培养液：吸取细胞培养液，1000-1500rpm，离心10min，取上清液进行测定。
4. 培养细胞：
a. 培养细胞的收集：
悬浮培养细胞：可直接通过离心收集沉淀细胞（1000rpm，离心10min，弃上清留沉淀细胞）。
贴壁培养的细胞：吸去上清，可通过细胞刮直接将细胞刮下，然后1000rpm，离心10min弃上清， 留沉淀细胞，再加入1mlPBS轻轻吹打，再次1000rpm，离心10min弃上清，留沉淀细胞待用。
b. 培养细胞的破碎：在细胞沉淀中加入一定量（10⁸ 的细胞一般加0.3-0.5ml）的缓冲液（缓冲液可以用 PBS或者是生理盐水），需保证超声探头在液面以下。功率300W，冰水浴，每3-5s超声一次，间隔4次 （每次间隔时间为30s左右）

二、测定过程参考操作表如下：

细胞（培养上清）中ALP的测定，如下操作表：

三、计算公式
1. 血清（浆）中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力（金氏单位/100ml）= （测定OD值 - 空白OD值）/(标准OD值 - 空白OD值)x酚标准品浓度（0.1mg/ml）x 100mlx 样本测定前稀释倍数
2. 组织样本中ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力（金氏单位/gprot）= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x 酚标准品浓度（0.1mg/ml）÷待测样本蛋白浓度（gprot/ml）
3、培养液中ALP活力计算公式：
单位定义：100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养液中ALP活力（金氏单位/100ml）= （测定OD值 - 空白OD值）/(标准OD值 - 空白OD值)x酚标准品浓度（0.02mg/ml）x 100mlx 样本测定前稀释倍数
4、培养细胞中ALP活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养细胞中ALP活力（金氏单位/gprot）= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x 酚标准品浓度（0.02mg/ml）÷待测样本蛋白浓度（gprot/ml）