ELISA KIT-人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体ELISA酶联免疫分析检测试剂盒

库存 ：10

保质期 ：6个月

保存条件 ：2-8度

规格 ：96T

上海韵涵生物专业供应人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体ELISA酶联免疫分析检测试剂盒和人抗单唾液酸神经节苷脂(GM2)抗体ELISA酶联免疫分析检测试剂盒。欢迎来电：15000505386！

人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体含

量。

实验原理

本试剂盒应用双原体夹心法测定标本中人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体水平。用纯

化的人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中

依次加入抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体，再与HRP 标记的抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)

抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在

HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的

抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），

通过标准曲线计算样品中人抗单唾液酸神经节苷脂(GM1)抗体浓度。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml ×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶

2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（320ng/ml） 0.5ml×1 瓶

3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶

4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张

6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

160ng/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

80ng/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

40ng/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

20ng/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

10ng/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，

然后再加待测样品10μl （样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽

量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此

重复5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止

液后15 分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标

准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，

即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好

控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值

大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计

算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6 个月