StemLite Pluripotency Kit

保存条件 ： 4℃保存

保质期 ： 6个月

英文名 ：StemLite Pluripotency Kit

库存 ： 1

供应商 ： 上海信裕

产品简介：对于StemLite Pluripotency Kit培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的StemLite Pluripotency Kit，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的StemLite Pluripotency Kit。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的StemLite Pluripotency Kit培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液StemLite Pluripotency Kit放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养StemLite Pluripotency Kit，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在StemLite Pluripotency Kit培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
StemLite Pluripotency Kit同类产品推荐：xy11405 猴肾细胞系 VERO E6细胞
xy11406 猴肾细胞系 MA-104细胞
xy11407 猴肾细胞系 BSC-1细胞
xy11408 猴肾细胞,Marc145细胞
xy11409 猴肾C M145细胞
xy11410 猴胚胎肾上皮细胞,marc-145-EGFP-puro细胞
xy11411 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞
xy11412 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞, RF/6A细胞
xy11413 猴的骨髓间充质干细胞,MSCS细胞
xy11414 喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞
xy11415 红曲霉
xy11416 红平红球菌
xy11417 红白细胞白血病细胞,HEL299细胞
xy11418 横纹肌瘤细胞,A-673细胞
xy11419 恒河猴肾细胞,MA-104细胞
xy11420 恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞
xy11421 恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞
xy11422 恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞
xy11423 恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞
xy11424 黑色素瘤细胞,B16细胞
xy11425 黑曲霉
xy11426 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞,RIN-m细胞,
xy11427 褐球固氮菌
xy11428 和元菌种与细胞
xy11429 汉逊德巴利酵母
xy11430 海枣曲霉
xy11431 哈茨木霉
xy11432 果子狸肾上皮细胞,Hed68细胞
xy11433 鲑鱼胚胎细胞,RTG细胞
xy11434 鲑鱼胚胎细胞,CHSE细胞
xy11435 光滑念珠菌
xy11436 光孢短柄帚霉
xy11437 骨髓瘤细胞株 U266细胞,
xy11438 骨髓瘤细胞,SP2/0细胞
xy11439 骨髓瘤细胞,P3X63Ag8细胞
xy11440 骨髓瘤细胞,P3X63Ag8.653细胞
xy11441 骨髓瘤细胞,P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]细胞
xy11442 骨髓瘤细胞,FO细胞
xy11443 骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞
xy11444 骨肉瘤细胞,SW1353细胞
xy11445 骨肉瘤细胞,MG-63细胞
xy11446 谷氨酸棒杆菌
xy11447 构巢曲霉
xy11448 狗肾细胞隆突型 MDCK superdome细胞
xy11449 狗肾细胞,Super Tube细胞
以上方法主要是针对贴壁生长的StemLite Pluripotency Kit，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止StemLite Pluripotency Kit脱落。