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文献和实验
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保存条件 : 密封干燥保存
保质期 : 6个月
英文名 :Luciferase Reporter Gene Assay Kit
库存 : 1000
供应商 : 钰博生物
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒产品简介报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit),是通过萤火虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin,在荧光素的氧化过程中,发出生物荧光(bioluminomescence),然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒产品特点
1) 简便,快捷。
2) 灵敏度高,可检测10-20 mol的荧光素酶。
3) 安全,非放射性。
4) 酶的浓度线性范围可达8个数量级。
产品组分
编号
组分
产品编号/规格
11401ES60(100T)
11401ES76(500T)
11401ES80(1000T)
11401-A
细胞裂解液
60ml
60ml×5
60ml×10
11401-B
萤火虫荧光素酶检测试剂
10ml
10ml×5
10ml×10
运输与保存方法
冰袋运输。
未拆封试剂盒-20℃避光保存,有效期为 6 个月。-70℃避光保存,有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)避光保存,不能反复冻融。
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒实验步骤
1. 细胞裂解:
1) 将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液(Cell lysis buffer),然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min,充分裂解细胞。
细胞培养板
96孔板
48孔板
24孔板
12孔板
6孔板
细胞裂解液(µl/孔)
30µl
60µl
120µl
250µl
500µl
【注】:裂解产物可室温保存6h,4℃保存16h,-70℃可长期存放。(裂解产物不能多次反复冻融)。
2) 将充分裂解后的裂解产物,10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2. 荧光素酶检测:
1) 按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10s,测定间隔为2s。
2) 将样品按照20~100µl的体积(如果样品量足够,请加入100µl)加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)混匀 2-3 次(不能漩涡混匀),充分混匀后测定RLU(Relative light unit),同时设置细胞裂解液(Cell lysis buffer)为对照孔。
注意事项
1) 温度会对酶的活性会产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用。
2) 如用单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3) 萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为 560nm。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒yb0135 小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞
yb0136 小鼠肾腺癌细胞,RAG细胞,
yb0137 小鼠肾系膜细胞,MC53细胞
yb0138 小鼠肾上腺皮质瘤细胞,Y1细胞,
yb0139 小鼠肾集合管细胞(SV40转化) M-1细胞
yb0140 小鼠肾癌细胞株 RuCa细胞
yb0141 小鼠肾癌细胞,Kert-3细胞
yb0142 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞,NG108-15 [ 108CC15 ]细胞
yb0143 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞,NG108-15细胞
yb0144 小鼠神经胶质瘤细胞,G422细胞
yb0145 小鼠软骨细胞,ATDC-5-EGFP细胞
yb0146 小鼠乳腺肿瘤细胞,C127细胞,
yb0147 小鼠乳腺癌细胞株 EMT-6细胞
yb0148 小鼠乳腺癌细胞,MA891细胞
yb0149 小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞
yb0150 小鼠乳腺癌细胞,4T1细胞
yb0151 小鼠乳腺癌高转移细胞,MA-891细胞
yb0152 小鼠乳腺 EMT6细胞
yb0153 小鼠乳癌細胞 4T1细胞
yb0154 小鼠肉瘤 S37细胞
yb0155 小鼠前列腺癌细胞,RM-1细胞,
yb0156 小鼠前成骨细胞,MC-3T3细胞
yb0157 小鼠皮下结缔组织细胞,L Wnt-3A细胞,
yb0158 小鼠皮下结缔组织细胞,A9细胞
yb0159 小鼠皮肤细胞,JB6-C41细胞
yb0160 小鼠皮肤细胞,JB6-C30细胞
yb0161 小鼠皮肤黑色素瘤细胞,B16-F10细胞,
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